果膠系列_半乳糖醛酸含量測試盒
測定方法:微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定之前選擇 2-3 個預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測定。
測定意義:
果膠是一類廣泛存在于植物細(xì)胞壁的初生壁和細(xì)胞中間片層的雜多糖。半乳糖醛酸是果膠酸的組成單位,也是果膠的主要成分,存在于植物的粘液、樹膠和細(xì)菌多糖中。
果膠系列_半乳糖醛酸含量測試盒
測定原理:
半乳糖醛酸在 70℃下與濃硫酸反應(yīng)生成 5-甲?;?2-呋喃甲酸,5-甲?;?2-呋喃甲酸與 3,5-二甲-基苯-酚反應(yīng)產(chǎn)生有色物質(zhì),在 450nm 下有大吸光值。
自備實驗用品及儀器:
天平、低溫離心機、酶標(biāo)儀、96 孔板、恒溫水浴鍋、硫酸、蒸餾水。
試劑組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 3mL×1 瓶,4℃保存。
試劑二:液體 2.5mL×1 瓶,4℃避光保存。
酶液提?。?br/>
稱取約 0.1g 組織,加入 1mL 蒸餾水,進(jìn)行冰浴勻漿。10000g 4℃離心 10min,棄上清,留沉淀。沉淀中加入 1mL 提取液,混勻后 90℃水浴 2h,冷卻至室溫,10000g4℃離心 10min,取上清待測。
計算公式:
標(biāo)準(zhǔn)曲線為 y = 2.2514x - 0.3763,R2 = 0.9969;x 為標(biāo)準(zhǔn)品濃度,mg/mL;y 為吸光值△A。半乳糖醛酸(μmol/g 鮮重)=( A+0.3763) ÷2.2514÷W×V 樣總÷194×1000
=2.29×(A+0.3763)÷W
V樣總:加入提取液體積,1mL;W,樣本質(zhì)量,g;194,半乳糖醛酸分子量。