土壤_土壤外切β14葡聚糖酶纖維二糖水解酶
測定方法：微量法
產(chǎn)品規(guī)格：100管/48樣
注 意：正式測定前務(wù)必取2-3個預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定
測定意義：
C1（EC3.2.1.91）存在于細(xì)菌、真菌和動物體內(nèi)，是纖維素酶系的組份之一，C1催化多聚糖鏈的末端非還原端釋放出纖維二糖和葡萄糖。
土壤_土壤外切β14葡聚糖酶纖維二糖水解酶
測定原理：
采用3,5－二硝基水楊酸法測定S-C1催化微晶纖維素降解產(chǎn)生的還原糖的含量。
需自備的儀器和用品：
酶標(biāo)儀/可見分光光度計、水浴鍋、離心機(jī)、可調(diào)式移液器、96孔板/微量石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制：
提取液：液體100mL×1瓶，4℃保存；
試劑一：液體6mL×1瓶，4℃保存；
試劑二：液體25mL×1瓶，4℃保存；
樣品測定的準(zhǔn)備：
稱取約0.1g新鮮土樣或風(fēng)干土樣，加入1mL提取液，進(jìn)行冰浴勻漿，室溫振蕩提取30min，然后10000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。
測定步驟：
1、分光光度計或酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長至540nm，蒸餾水調(diào)零。
2、加樣表（在EP管中依次加入下列試劑）：
試劑名稱（μL）測定管對照管
樣本1010
試劑一 100
蒸餾水 100
混勻，37℃準(zhǔn)確水浴2h
試劑二 200200
混勻， 90℃水浴10min（蓋緊，防止水分散失），冷卻后，取200μL至微量石英比色皿或96孔板中，測540nm下吸光值A(chǔ)，計算ΔA=A測定管-A對照管。每個測定管需設(shè)一個對照管。
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