(輔酶Ⅱ)(G6PDH)葡萄糖6磷酸脫氫酶測試盒
測定方法:微量法
產品規(guī)格:100管/96樣
注 意:正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義:
G6PDH(EC 1.1.1.49)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中,是磷酸戊糖途徑的關鍵酶,催化 6-磷酸葡萄糖氧化為 6 -磷酸葡萄糖酸內酯,同時將NADP+還原為NADPH,供生物合成及維持細胞內的還原狀態(tài)用。因此6-磷酸葡萄糖脫氫酶活性的高低可以從一定程度上反映出生物體的生物合成和抗氧化能力。
測定原理:
G6PDH催化NADP+還原生成NADPH,在340 nm下測定NADPH增加速率。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
試劑的組成和配制:
提取液:液體100mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體19 mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:粉劑×1瓶,-20℃保存;
試劑三:粉劑×1瓶,-20℃保存;
(輔酶Ⅱ)(G6PDH)葡萄糖6磷酸脫氫酶測試盒
樣本的前處理:
1、細菌、細胞或組織樣品的制備:
細菌或培養(yǎng)細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數(shù)量(104個):提取液體積(mL)為1000~5000:1的比例(建議2000萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。