ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為何要稀釋？有兩個(gè)原因：
1，比賽克制比照明顯，應(yīng)稀釋比賽物；
2，以下降非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。
血清稀釋用一般的PBS即可，可加1％的BSA，能有用下降ELISA本底，當(dāng)然假設(shè)你嫌費(fèi)事我覺(jué)得用生理鹽水替代PBS聯(lián)絡(luò)也不大。不論你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數(shù)必定要事前斷定，但也不用一點(diǎn)點(diǎn)，你做一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)即可，選擇OD在1.0左右的稀釋倍數(shù)，即你的ELISA中陰性孔OD在1.0，這么作出來(lái)的曲線比照活絡(luò)。
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的過(guò)程：
先把蛋白稀釋必定的倍數(shù)，比如說(shuō)10倍、20倍稀釋（這么可以大體斷定一個(gè)參數(shù)），將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板，再用必定稀釋度的陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清進(jìn)行孵育后洗刷，再加酶聯(lián)絡(luò)物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗刷后，加底物溶液顯色，中止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，選擇O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般老是要選擇那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參看血清O.D值懇求<0.1-0.2。也就是懇求陽(yáng)性參看血清和陰性參看血清的O.D值有明顯不同。
ELISA試劑盒是以免疫學(xué)反應(yīng)為根底，將抗原、牽9體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相聯(lián)絡(luò)起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。由于抗原、抗體的反應(yīng)在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進(jìn)行，每參與一種試劑孵育后，可通過(guò)洗刷除去剩下的游離反應(yīng)物，然后保證實(shí)驗(yàn)效果的特異性與穩(wěn)定性。在實(shí)踐運(yùn)用中，通過(guò)不一樣的規(guī)劃，具體的方法過(guò)程可有多種。