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ELISA試劑盒酶標(biāo)板關(guān)鍵有哪些

時(shí)間:2021-12-30閱讀:1158
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我們根據(jù)ELISA試劑盒不同的分類標(biāo)準(zhǔn),酶標(biāo)板有著不同的分類。


一、根據(jù)孔數(shù),ELISA試劑盒酶標(biāo)板關(guān)鍵分類酶標(biāo)板關(guān)鍵分類可分為96孔、48孔等,由于酶標(biāo)板首要是協(xié)作酶標(biāo)儀用,現(xiàn)在市面上的酶標(biāo)儀有48孔和96孔,但酶標(biāo)板常用的是96孔。


二、根據(jù)其底部的不同,又分為平底的,U型底、V型底等。平底的折射率低,適于在酶標(biāo)儀檢測(cè);U型底的酶標(biāo)板折射率較高,便當(dāng)加樣、吸樣、混勻等操作,可以不用放在酶標(biāo)儀上,直接通過目測(cè)調(diào)查色彩改動(dòng)狀況,然后斷定有無相應(yīng)的免疫反應(yīng)。V底的酶標(biāo)板可以的汲取樣品。


三、根據(jù)酶標(biāo)板與蛋白和其它分子結(jié)合才干的不同,又分為高結(jié)合力、中結(jié)合力和氨基化等。

1) 高結(jié)合力

此種酶標(biāo)板,表面經(jīng)處理后,其蛋白結(jié)合才干大大增強(qiáng),可達(dá)300~400ng IgG/cm2,首要結(jié)合的蛋白分子量>10kD。運(yùn)用該類酶標(biāo)板可進(jìn)步敏感性,并可相對(duì)減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易發(fā)生非特異性反應(yīng)??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結(jié)合蛋白的部位,需運(yùn)用蛋白作為封閉劑。

(2) 中結(jié)合力

此類酶標(biāo)板經(jīng)表面疏水鍵與蛋白結(jié)合,適宜作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結(jié)合才干為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標(biāo)板所具有的僅與大分子結(jié)合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可下降潛在的非特異性穿插反應(yīng)。該類板可以慵懶蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)

(3)氨基化

ELISA試劑盒這種酶標(biāo)板經(jīng)表面改性處理后具有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵代替。該類酶標(biāo)板適宜作為小分子蛋白的固相載體。運(yùn)用適宜的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負(fù)電荷的小分子結(jié)合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價(jià)結(jié)合的才干,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于下降了疏水性,一部分蛋白分子無法結(jié)合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價(jià)的表面特性,運(yùn)用的封閉液有必要可以與非反應(yīng)性氨基基團(tuán)和所挑選的交聯(lián)劑中任何功用基團(tuán)發(fā)生作用。


四、根據(jù)色彩可分為透明、黑色、白色。

透明的是常用的,用于一般的酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)。相對(duì)于透明的的酶標(biāo)板,還有用于發(fā)光檢測(cè)用的不透明的酶標(biāo)板,一般有黑色和白色兩種。黑色的酶標(biāo)板本身會(huì)有光吸收,所以它的信號(hào)相對(duì)于白色酶標(biāo)板要低許多,因而一般用于檢測(cè)較強(qiáng)的光,如熒光檢測(cè)。而白色的酶標(biāo)板就用于較弱的光檢測(cè),常用于一般的化學(xué)發(fā)光。其他黑色的酶標(biāo)板還可以消弱非特異反應(yīng)帶來的問題。一同需求留意的是,用一般的酶標(biāo)板不可以進(jìn)行發(fā)光檢測(cè),由于一般從化學(xué)發(fā)光反應(yīng)中發(fā)射出的光是各向同性,如果用透明的酶標(biāo)板,光不只會(huì)從筆直方向發(fā)散,還會(huì)從水平方向發(fā)散,使得光極易通過各個(gè)孔之間的空地和孔壁,然后導(dǎo)致各孔的光吸收值遭到相鄰孔發(fā)射光的影響。

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