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上海紀寧實業(yè)有限公司

小鼠ELISA試劑盒的概述以及技術流程

時間:2021-6-29閱讀:1358
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一、小鼠ELISA試劑盒的概述:

1、靈敏度:有二層含義,為試劑檢出被檢物質(zhì)的低量的能力;為試劑對大量樣品中陽性檢出的能力。

2、特異性:常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結(jié)構(gòu)部份的物質(zhì)可能存在交叉反應,使測定結(jié)果升高,可能導致假陽性,所以交叉反應是評價其質(zhì)量的關鍵指標。

3、簡便性:指在不影響試劑的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結(jié)果判斷簡單明了,定量試驗結(jié)果計算也應簡單。

4、安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。

5、經(jīng)濟性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術進步降低成本,而市場價格比較合理。

6、試劑評價:需要有的確證方法和確證的樣品進行檢測。

二、小鼠ELISA試劑盒的技術流程:

1、ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性。

2、又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。

3、再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。

4、加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。

5、由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。

6、然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。

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