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當(dāng)前位置:上海紀(jì)寧實業(yè)有限公司>>技術(shù)文章>>挑選科研ELISA試劑盒請依據(jù)樣品中檢測物水平
ELISA試劑盒如果試驗君的試驗樣品為人、小鼠或大鼠樣品,那么要挑選一個合適的試劑盒相對簡單,但如果您的試驗樣品來歷于其他物種如雞、牛、猴等,則市面上能提供的試劑盒品種卻很少。且不可輕信能提供近萬種試劑盒,掩蓋多物種的供貨商。但如果又非要檢測這些物種的目標(biāo)時,要對待檢物(如有種屬差異性)進(jìn)行同源性剖析以及試劑盒的種屬穿插反響數(shù)據(jù)。關(guān)于樣品類型而言,一般的商業(yè)化試劑盒都通過血清、血漿和細(xì)胞培養(yǎng)上清液的驗證。在挑選試劑盒時,要具體閱覽說明書,比方血漿樣本抗凝劑的運用是否與試劑盒兼容。另外,在某些景象下樣品中會存在干擾要素比方溶血血漿、高脂肪含量的樣品、人抗鼠抗體(HAMA)、細(xì)胞培養(yǎng)上清中含胎牛血清等。因而需依據(jù)樣品來挑選試劑盒,必要時還要依據(jù)樣正本恰當(dāng)優(yōu)化?;蛟跇悠匪鸭埃乳営[一些牢靠供貨商試劑盒的說明書或直接咨詢。如果您的樣品為安排或細(xì)胞裂解物,則需求更慎重的挑選試劑盒。市面上大多數(shù)的商業(yè)化試劑盒沒有通過多種來歷安排樣本的驗證。這需求試驗君能了解不是一切試劑盒所用的抗體對,都能特異的從一堆裂解物蛋白中特異檢出您的意圖蛋白,還要考慮安排樣品的基質(zhì)效應(yīng)(Matrix Effect)等。但如果試驗君要了解安排樣品的制備問題,我們另起一文來總結(jié)。
依據(jù)樣品中檢測物水平來挑選科研ELISA試劑盒
如果試驗君關(guān)于樣品中待檢物的水平?jīng)]有任何可參閱的數(shù)據(jù),挑選寬動力學(xué)檢測規(guī)模的試劑盒。如果樣品中待檢物的含量很低,主張?zhí)暨x高靈敏度的試劑盒。為了下降基質(zhì)效應(yīng),有必要用稀釋液至少做2倍稀釋。如果樣品中待檢物含量遠(yuǎn)超過試劑盒的檢測規(guī)模(標(biāo)曲規(guī)模), 也需做恰當(dāng)?shù)谋稊?shù)稀釋。在zui終計算結(jié)果時,需乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
依據(jù)樣本可獲得性來挑選科研ELISA試劑盒
一般而言,商業(yè)化試劑盒的樣品用量都在50ul或100ul, 但也有一些供貨商的試劑盒對樣品的用量要求可少至10ul。如果您的樣品很寶貴或較難獲取,則需求仔細(xì)考慮試劑盒對樣品用量的要求。如果樣品量少,且要做多因子檢測時更需慎重。
細(xì)致比較科研ELISA試劑盒要害性技術(shù)參數(shù)
ELISA試劑盒的要害技術(shù)參數(shù)包括板內(nèi)差異性、板間差異性、批間差異性、重復(fù)性、特異性及穿插反響性、回收率等。如果試驗君常常展開ELISA試驗,主張運用同一廠家的試劑盒,這樣可盡量確保數(shù)據(jù)的重復(fù)性(當(dāng)然條件是試驗條件的一致性)。關(guān)于科研用的定量ELISA試劑盒,不同的生產(chǎn)廠家運用的抗體對、酶以及底物、生產(chǎn)工藝和研發(fā)實力不盡相同,自然不同廠家試劑盒測出的數(shù)據(jù)會有差異。
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