一、細胞復(fù)蘇

將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動促進其融化。移人15ml離心管中，加入10ml預(yù)熱的DMEM*培養(yǎng)基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。

二、細胞傳代

加入10ml PBS清洗細胞培養(yǎng)盤，轉(zhuǎn)移至15ml離心管，2000rpmX2min，棄上清液。再加入10ml PBS（經(jīng)高壓滅菌，保存于40C），吹勻，吸取10微升進行計數(shù)，按照1×106/盤接種，在含5%CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。

細胞密度達到80%～90%時，去培養(yǎng)基，10ml PBS清洗2次。放人細胞培養(yǎng)箱3min。轉(zhuǎn)移至15ml離心管。加入10ml PBS清洗細胞培養(yǎng)盤，轉(zhuǎn)移至15ml離心管，2000rpmX2min，棄上清液。

凍存液的配制：70%的*培養(yǎng)基+20%FBS+10%DMSO.DMSO要慢慢滴加，邊滴邊搖。

1.進入細胞間開始細胞培養(yǎng)時，必須嚴格按照下列步驟操作：

2.確定衣服的袖口已經(jīng)卷起或者白大褂的袖口已經(jīng)扎緊。

3.確定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。為了方便單手開啟瓶蓋，實驗開始前可以把所有瓶蓋旋松。

4.操作時如果不能肯定所用的耗材是潔凈的，必須及時更換。

上海紀(jì)寧實業(yè)有限公司位于中國*大城市——中華人民共和國直轄市之一的上海，已發(fā)展成集科研、生產(chǎn)、銷售為一體的創(chuàng)新性企業(yè)。公司專注于生物、生化領(lǐng)域產(chǎn)品銷售，主要經(jīng)營的有ELISA試劑盒、生化試劑、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品、對照品、細胞、血清、培養(yǎng)基等生化產(chǎn)品。