B0213    BAPNA Na-苯甲酰-DL-*-對(duì)硝基酰胺鹽酸    國(guó)產(chǎn)

操作步驟：

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。

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自備物品

1. 酶標(biāo)儀（建議參考儀器使用說明提前預(yù)熱）

2. 微量加液器及吸頭，EP管

3. 蒸餾水或去離子水，全新濾紙

B0213    BAPNA Na-苯甲酰-DL-*-對(duì)硝基酰胺鹽酸    國(guó)產(chǎn)

43760 DTNB 5,5二巰基-2,2-二硝基苯甲醛 國(guó)產(chǎn) 1g 瓶
45520 Glufosinate-ammonium 草銨膦 Fluka 100mg 瓶
4583 櫻花* OCT(櫻花) 118ml 瓶 
458-37-7 Curcumin 姜黃素  國(guó)產(chǎn) 5g 瓶
48280 D-(+)-Galacturonic acid D-半乳糖醛酸 Fluka 1g 瓶
48280 D-(+)-Galacturonic acid D-半乳糖醛酸 Fluka 5g 瓶
50020 β-甘油磷酸二鈉鹽 Fluka 10g 瓶
50950 Guanidine HCl   鹽酸胍 Fluka 100g 瓶
50950 Guanidine HCl   鹽酸胍 Fluka 500g 瓶
56710 Janus Green B詹納斯綠B Fluka 1g 瓶
59865-13-3 Cyclosporin A  環(huán)孢菌素 A（*） 國(guó)產(chǎn) 250mg 支
6055-19-2（C0768） Cyclophosphamide monohydrate * sigma 1g 支
62143  Lincomycin Hydrochloride *鹽酸鹽（鹽酸*） sigma 1g 瓶
70458-96-7 Norfloxacin  * 國(guó)產(chǎn) 1g  瓶
735094 Albumin BovineⅤ  牛血清白蛋白Ⅴ Roche 5g 瓶
74385 Nalidet P-40(NP-40) 濕潤(rùn)劑 P-40 Fluka 100ml 瓶
81422 PVP K-30  聚乙烯吡咯烷酮 Fluka 100g  瓶
83200 PyroninG(Y）吡啰紅G派洛寧G (Y) fluka 5g 瓶
9054-89-1  Sod  超氧化物岐化酶（來源牛紅細(xì)胞） sigma 3000u 瓶
94335(U4625) UDP-glucose  UDP-葡萄糖 Fluka 10mg 支
94335(U4625) UDP-glucose  UDP-葡萄糖 Fluka 100mg 支
A0001 L-Aspartic acid L-天*(水物) 上海 25g 瓶
A0002 L-Asparagine L-天* 上海 25g  瓶
A0013 L-Arginine  L-* 上海 25g  瓶
A0512 Amylose 直鏈淀粉  Sigma 250mg 瓶
A0606 Ammonium ferric sulfate 硫酸鐵銨 國(guó)產(chǎn) 500g 瓶 
A0608 Artemisinin 青蒿素 國(guó)產(chǎn) 5g 瓶 
A0665 Amoxicillin trihydrate * 　 1g  瓶 
A0668 Acridine red  吖啶紅 國(guó)產(chǎn) 5g 瓶 
A0680 Aniline blue water soluble 苯胺藍(lán)（水溶） 國(guó)產(chǎn) 5g 瓶 
A0860 APTES * KH550 國(guó)產(chǎn) 500ml 瓶 
A0880 Azocarmine B 偶氮胭脂紅B 國(guó)產(chǎn) 10g 瓶 
A1049 Abscisic acid (ABA) 　脫落酸  Sigma 25mg 支
A1049 Abscisic acid (ABA) 　脫落酸  Sigma 100mg 瓶
A1360 pGEM-T easy               promega原裝 1.2ug 支
A1360 pGEM-T easy Vector (T載體） promega原裝 1.2ug 支
A1653 Albumin  Human   人血清白蛋白 Sigma 500mg 瓶
A1653 Albumin  Human   人血清白蛋白 Sigma 1g 瓶
A1784 Aminopterin  氨基喋呤 Sigma 5mg 瓶