SH30070.02E
[注意事項]
1. 血清解凍:將血清從冰凍區(qū)中取出后(切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀),先置于2~8℃區(qū)域中使之融化,然后在室溫下使之全融。使用前再預溫到將使用的溫度(如37℃),但必須注意的是,解凍過程中應輕輕地搖晃均勻。
血清在解凍過程中可能會出現(xiàn)少量絮狀或片狀析出物,主要是血清中脂蛋白的變性或是纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)析出,但這些析出物,并不影響血清本身的質量。 若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?,再放回冷凍?br />2.血清熱滅活:一般以56℃、30分鐘水浴來處理已預溫至該溫度的血清。
因為此加熱步驟,可以使補體去活性,而補體所參與的反應有:溶細胞活性,平滑肌的收縮,肥大細胞和血小板組胺的釋放,增強吞噬作用,淋巴細胞、巨噬細胞的趨化和激活。實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數(shù)的細胞而言是不需要的。經過處理的血清對細胞生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者認為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議若非必須,可以不需要做熱滅活這一步,以確保血清的質量。
3.避免析出物和澄明度降低:建議在使用血清的時候,注意正確的血清解凍步驟,并盡量避免熱滅活血清及長時間的將血清置于非凍結狀態(tài)。
[貯存條件]-20~-10℃。
[有 效 期]五年。
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