小鼠血小板活化因子 ELISA檢測說明書,北京PAF ELISA Kit代測
酶標(biāo)試劑盒操作中出現(xiàn)的問題:現(xiàn)象、可能原因和解決辦法:
1、 不同廠家生產(chǎn)的試劑盒因生產(chǎn)工藝和操作方法略有不同,務(wù)必按照所用試劑盒嚴(yán)格操作,否則容易產(chǎn)生檢測結(jié)果的不確定性.
2、 若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行交叉使用,有可能出現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等情形。
3、 加樣時樣品量誤差,對于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對閾值附近的標(biāo)本影響*,建議校對加樣器。
4、 反應(yīng)時間的誤差,做大量標(biāo)本時,*孔和zui后一孔以及一些特殊標(biāo)本可能影響較大。
5、 由于滴瓶的精密性肯定不如加樣器,不排除不同滴頭滴量的誤差。另外滴加過程中是否產(chǎn)生氣泡、速度是否均勻,是否顫動等影響液量的因素均可導(dǎo)致以上情況。高標(biāo)準(zhǔn)要求時應(yīng)使用加樣器。
6、 閾值附近實(shí)際上是個灰區(qū)(gray scale),不能截然分為陰性、陽性,國外廠家均要求對這部分可疑標(biāo)本進(jìn)行奇數(shù)次復(fù)檢,以次數(shù)多者為準(zhǔn),如一次陽兩次陰zui后判為陰,但實(shí)際上是否為陰不好說,只有判為可疑,臨床上可以讓患者過一段時間后再測。
7、 肉眼觀察稍顯色,酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實(shí)際工作中是難以避免的,肉眼目測結(jié)果不可靠,應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。
8、 由陰性變?yōu)閺?qiáng)陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關(guān)。
9、 臨界值附近標(biāo)本波動為正常現(xiàn)象,任何試劑均不可避免??梢钥紤]將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。
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ELISA實(shí)驗(yàn)操作注意事項(xiàng):
大部分實(shí)驗(yàn)室在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測判斷結(jié)果,操作過程隨意性較大,在使用酶標(biāo)儀后操作必須規(guī)范:
A. 使用移液器加液,移液槍頭不能混用。
B. 洗板要干凈,避免交叉污染。
C. 嚴(yán)格按照試劑盒的說明書操作,反應(yīng)時間準(zhǔn)確。
D. 請勿將樣品或試劑灑到儀器表面或內(nèi)部,操作完成注意做好清潔工作。
E. 不要在測量過程中關(guān)閉電源。
F. 對于因試劑盒問題造成的測量結(jié)果的偏差,應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況及時修改參數(shù),以達(dá)到*效果。
G. 使用后蓋好防塵罩。
H. 出現(xiàn)技術(shù)故障時應(yīng)及時與廠家,切勿擅自拆卸酶標(biāo)儀。
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