人布魯氏菌抗體IgGelisa試劑盒實驗原理:
用純化的MT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、*化的MT抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的MT呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品英文: Human Brucella Antibody IgG,Brucella Ab IgG elisa Kit
產(chǎn)品用途:僅供科研使用
檢測范圍:15.6 pg/ml - 1,000 pg/ml
特 異 性:本試劑盒可同時檢測重組或天然的,且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)
人布魯氏菌抗體IgGelisa試劑盒操作基本步驟:
1、 試劑準備:所有試劑在使用前應(yīng)平衡至室溫,使用后請立即按照說明書要求保存試劑。實驗操作中請使用一次性的吸頭,避免交叉污染。
2、 加樣:加樣或加試劑時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)溫育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。一次加樣時間(包括標準品及所有樣品)控制在10分鐘內(nèi)。*設(shè)置復(fù)孔進行實驗。
3、 溫育:為防止樣品蒸發(fā),實驗時將加上蓋或覆膜的酶標板置于濕盒內(nèi),以避免液體蒸發(fā);洗板后應(yīng)盡快進行下步操作,任何時侯都應(yīng)避免酶標板處于干燥狀態(tài);同時應(yīng)嚴格遵守給定的溫育時間和溫度。
4、 洗滌:洗滌過程中反應(yīng)孔中殘留的洗滌液應(yīng)在濾紙上拍干,勿將濾紙直接放入反應(yīng)孔中吸水,同時要消除板底殘留的液體和手指印,避免影響zui后的酶標儀讀數(shù)。
5、 試劑配制:Detection A及Detection B在使用前請手甩幾下或少時離心處理,以使管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液請依據(jù)所需的量配制使用,并使用相應(yīng)的稀釋液配制,不能混淆。請精確 配制標準品及工作液,盡量不要微量配制(如吸取檢測溶液A時,一次不要小于10 ),以避免由于不準確稀 釋而造成濃度誤差;請勿重復(fù)使用已稀釋過的標準品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B工作液。
6、 反應(yīng)時間的控制:加入底物后請定時觀察反應(yīng)孔的顏色變化(比如,每隔10分鐘),如顏色較深,請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應(yīng),避免反應(yīng)過強從而影響酶標儀光密度讀數(shù)。
7、 底物:底物請避光保存,在儲存和溫育時避免強光直接照射。
補充說明
1. 在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致出現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
2. 小心吸取試劑并嚴格遵守給定的孵育時間和溫度。請注意在吸取標本 / 標準品,酶結(jié)合物或底物時,*個孔與zui后一個孔加樣之間的時間間隔如果太大,將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育”時間,從而明顯地影響到測量值的準確性及重復(fù)性。而且,洗滌不充分將影響試驗結(jié)果。
3. 試劑盒保存:部分試劑保存于-20℃,部分試劑保存于2-8℃,具體以標簽上的標示為準。
4. 濃洗滌液會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。
5. 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì),此為正常現(xiàn)象,不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
6. 中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準。
7. 所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測裝置。
8. 有效期:6個月
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