DNA酶瓊脂配方:(g/L) | |
胰蛋白胨 大豆胨 氯化鈣 氯化鈉 DNA 瓊脂 pH值7.3 ± 0.2 | 15.0 5.0 0.02 5.0 2.0 15.0 25℃ |
原理: | |
胰蛋白胨、大豆胨提供氮源、維生素及生長因子,滿足細(xì)菌生長的需求。具有脫氧核糖核酸酶的細(xì)菌分解培養(yǎng)基中的脫氧核糖核酸(DNA),使DNA長鏈水解成數(shù)個單核苷酸的寡核苷酸短鏈;氯化鈣提供陽離子作為激活劑;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂為培養(yǎng)基的凝固劑。 | |
DNA酶瓊脂用法: | |
稱取本品 42.0g,緩緩加熱溶解于1000ml 蒸餾水中(避免形成不溶性絲狀物),116℃高壓 滅菌 15 分鐘,冷至 50℃左右時,傾入無菌平皿。將平板培養(yǎng)基分成 4-8 區(qū),每區(qū)用接種環(huán)劃線肉湯培養(yǎng)物,37℃培養(yǎng) 18-24 小時,在培養(yǎng)基表面滴加 1mol/l 鹽酸,若為 DNA 酶陽性,在生長菌落周圍產(chǎn)生明顯透明環(huán)。如果加入 0.1% 甲苯胺藍(lán)溶液,殘留 DNA 部分變藍(lán),其水解部分變?yōu)樗N薇色。 |