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大鼠一氧化氮合成酶(NOS)酶聯(lián)免疫分析試劑盒操作方法

時間:2015/3/18閱讀:232
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本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍:                                                          96T

1μmol/L - 32μmol/L

使用目的:

本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中一氧化氮合成酶(NOS)含量

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠一氧化氮合成酶(NOS)水平。用純化的大鼠一氧化氮合成酶(NOS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入一氧化氮合成酶(NOS),再與HRP標記的一氧化氮合成酶(NOS)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的一氧化氮合成酶(NOS)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠一氧化氮合成酶(NOS)濃度。

操作程序總結:


計算

  以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。

注意事項

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。

   4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

   5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

   6.底物請避光保存。

   7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

   9.本試劑不同批號組分不得混用。

   10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:2-8。

2.有效期:6個月

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