免疫細胞化學結(jié)果的判斷，對免疫細胞化學結(jié)果的判斷應持科學的慎重態(tài)度，要準確判斷陽性和陰性，排除假陽性和假陰性結(jié)果，必須嚴格對照實驗，對新發(fā)現(xiàn)的陽性結(jié)果，除有對照試驗結(jié)果之外，應進行多次重復實驗，要求用幾種方法進行驗證，如用PAP法陽性，可再用ABC法驗證。必須學會判斷特異性染色和非特異性染色，對初學者更為重要，否則會得出不科學的結(jié)論。特異性染色與非特異性染色的鑒別點主要在于特異性反應產(chǎn)物常分布于特定的部位，如胞漿內(nèi)，也有分布在細胞核和細胞表面的，即具有結(jié)構(gòu)性。特異性染色表現(xiàn)為在同一切片上呈現(xiàn)不同程度的陽性染色結(jié)果。非特異性染色表現(xiàn)為無一定的分布規(guī)律，常為某一部位成片的均勻著色，細胞和周圍的結(jié)締組織均無區(qū)別的著色，或結(jié)締組織呈現(xiàn)很強的染色。非特異性染色常出現(xiàn)在干燥切片的邊緣，有刀痕或組織折疊的部位。在過大的組織塊，中心固定不良也會導致非特異性染色。有時可見非特異性染色和特異性染色同時存在，由于過強的非特異性染色背景不但影響對特異性染色結(jié)果的觀察和記錄，而且令人對其特異性結(jié)果產(chǎn)生懷疑。
（一）陽性細胞的染色特征
免疫細胞化學的呈色深淺可反映抗原存在的數(shù)量，可作為定性、定位和定量的依據(jù)。
（1）陽性細胞染色分布有三種類型：①胞漿；②細胞核；③細胞膜表面。大部分抗原見于細胞漿，可見于整個胞漿或部分胞漿。
（2）陽性細胞分布可分為煙性和彌漫性。
（3）由于細胞內(nèi)含抗原量的不同，所以染色強度不一。如果細胞之間染色強度相同，常提示其反應為非特異性。
（4）陽性細胞染色定位于細胞，且與陰性細胞相互交雜分布；而非特異性染色常不限于單個細胞，而是累及一片細胞。
（5）切片邊緣、刀痕或皺折區(qū)域，壞死或擠壓的細胞區(qū)，膠原結(jié)締組織等，常表現(xiàn)為相同的陽性染色強度，不能用于判斷陽性。
（二）染色失敗的幾種原因
（1）所染的全部切片均為陰性結(jié)果：包括陽性對照在內(nèi)，全部呈陰性反應，原因可能是：①染色未嚴格按操作步驟進行；②漏加一種抗體，或抗體失效；③緩沖液內(nèi)含*，抑制了酶的活性；④底物中所加H2O2量少或失效；⑤復染或脫水劑使用不當。
（2）所有切片均呈弱陽性反應：①切片在染色過程中抗體過濃，或干燥了；②緩沖液配制中未加氯化鈉和pH值不準確，洗滌不*；③使用已變色的呈色底物溶液，或呈色反應時間過長；④抗體溫育的時間過長；⑤H2O2濃度過高，呈色速度過快；⑥粘附劑太厚。
（3）所有切片背景過深；①未用酶消化處理切片；②切片或涂片過厚；③漂洗不夠；④底物呈色反應過久；⑤蛋白質(zhì)封閉不夠或所用血清溶血；⑥使用全血清抗體稀釋不夠。
（4）陽性對照染色良好，檢測的陽性標本呈陰性反應，固定和處理不當是zui常見的原因。
對于陽性結(jié)果的定量判斷常規(guī)方法是根據(jù)呈色深淺和陽性細胞數(shù)量分類計數(shù)，以（-）、+、++、+++等分級和計數(shù)統(tǒng)計?，F(xiàn)在已采用圖象分析計量，本書第九章 將詳細敘述這種使免疫細胞化學的定量成為可能的*的形態(tài)定量方法。另外，第十章 將詳細途述另一種*的免疫細胞化學計量分類術(shù)－流式細胞光度計技術(shù)。