犬弓形蟲(chóng)TOXELISA試劑盒FOR RESEARCH USE ONLY

Drug Names

Generic Name：犬弓形蟲(chóng)TOXELISA試劑盒

      This kit can be used for determination of serum, plasma and liquid samples Organization Content.

The experimental principle:

The product levels were measured in samples of the kit by double antibody sandwichmethod. The product with the purified antibody coated microtiter plate, made of solid phase antibody, to package is the product antigen monoclonal antibodies are then added to the micropores, the product and then with HRP labeled antibody binding, the formation of antibody - antigen - antibody complex enzyme label, after thorough washing with TMB chromogenic substrate. TMB in the HRP enzyme catalytic conversion into the blue, and in the action of acid into the final yellow. This product is positively related to the depth of color and in the samples. Instrument measured absorbance in the 450nm wavelength with ELISA (OD), the product concentration in the samples was calculated by standard curve.

Materials provided with the kit

Specimen requirements

• serum- coagulation at room temperature 10-20 mins，centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• plasma-use suited EDTA or citrate plasma as an anticoagulant,mix 10-20 mins ,centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Urine-collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again. The Operation of Hydrothorax and cerebrospinal fluid Reference to it.
• cell culture supernatant-detect secretory components, collect sue a sterile container, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant,detect the composition of cells, Dilut cell suspension with PBS（PH7.2-7.4）, Cell concentration reached 1 million / ml, repeated freeze-thaw cycles, damage cells and release of intracellular components, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant, If precipitation appeared, Centrifugal again.
• Tissue samples- After cutting samples, check the weight,add PBS（PH7.2-7.4）, Rapidly frozen with liquid nitrogen, maintain samples at 2-8℃ after melting,add PBS（PH7.4）, Homogenized by hand or Grinders, centrifugation 20-min at the speed of 2000-3000 r.p.m. remove supernatant.
• extract as soon as possible after Specimen collection,and according to the relevant literature, and should be experiment as soon as possible after the extraction. If it can’t, specimen can be kept in -20 ℃ to preserve, Avoid repeated freeze-thaw cycles.
• Can’t detect the sample which contain NaN3, because NaN3 inhibits HRP active.

Assay procedure

1.Dilute and add sample to Standard: set 10 Standard wells on the ELISA plates coated, add Standard 100μl to the first and the second well, then add Standard dilution 50μl to the first and the second well, mix; take out 100μl form the first and the second well then add it to the third and the forth well separay. then add Standard dilution 50μl to the third and the forth well ,mix ; then take out 50μl from the third and the forth well discard, add 50μl to the fifth and the sixth well ,then add Standard dilution 50μl to the fifth and the sixth well, mix ; take out 50μl from the fifth and the sixth well and add to the seventh and the eighth well, then add Standard dilution 50μl to the seventh and the eighth well ,mix ; take out 50μl from the seventh and the eighth well and add to the ninth and the tenth well, add Standard dilution 50μl to the ninth and the tenth well, mix , take out 50μl from the ninth and the tenth well discard(add Sample 50μl to each well after Diluting ,(density: 240ng/L,160ng/L ,80ng/L,40ng/L, 20ng/L)

2.add sample：Set blank wells separay (blank comparison wells don’t add sample and HRP-Conjugate reagent, other each step operation is same). testing sample well. add Sample dilution 40μl to testing sample well, then add testing sample 10μl (sample final dilution is 5-fold), add sample to wells , don’t touch the well wall as far as possible, and Gently mix.

3.Incubate: After closing plate with Closure plate membrane ,incubate for 30 min at 37℃.

4.Configurate liquid: 30-fold (or 20-fold)wash solution diluted 30-fold (or 20-fold) with distilled water and reserve.

5.washing：Uncover Closure plate membrane, discard Liquid, dry by swing, add washing buffer to every well, still for 30s then drain, repeat 5 times, dry by pat.

6.add enzyme：Add HRP-Conjugate reagent 50μl to each well, except  blank well. 

7.incubate：Operation with 3.

8.washing：Operation with 5.

9.color：Add Chromogen Solution A 50ul and Chromogen Solution B to each well, evade the light preservation for 15 min at 37℃

10.Stop the reaction：Add Stop Solution50μl to each well, Stop the reaction(the blue color change to yellow color).

11.assay：take blank well as zero , Read absorbance at 450nm after Adding Stop Solution and within 15min.

Important notes

• The kit takes out from the refrigeration environment should be balanced 15-30 minutes in the room temperature, ELISA plates coated if has not use up after opened, the plate should be stored in Sealed bag.
• washing buffer will Crystallization separation, it can be heated the water helps dissolve when dilute . Washing does not affect the result.
• add Sample with sampler Each step, And proofread its accuracy frequently, avoids the experimental error. add sample within 5 mins, if the number of sample is much , recommend to use Volley .
• if the testing material content is excessively higher (The sample OD is bigger than the first standard well ),please dilute Sample (n-fold), Please diluente and multiplied by the dilution factor.（×n×5）.
• Closure plate membrane only limits the disposable use, to avoid cross-contamination.
• The substrate evade the light preservation.
• Please according to use instruction strictly, The test result determination must take the microtiter plate reader as a standard.
• All samples, washing buffer and each kind of reject should according to infective material process.
• Do not mix reagents with those from other lots.

Calculate：

Take the standard density as the horizontal, the OD value for the vertical ,draw the standard curve on graph paper, Find out the corresponding density according to the sample OD value by the Sample curve, multiplied by the dilution multiple, or calculate the straight line regression equation of the standard curve with the standard density and the OD value ,with the sample OD value in the equation, calculate the sample density, multiplied by the dilution factor, the result is the sample actual density.

Storage and validity

1．Storage：  2-8℃.

2．validity： six months.

其它產(chǎn)品人內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA 試劑盒
人血管緊張素（Ang )ELISA 試劑盒
人17羥孕酮(17-OHP)ELISA 試劑盒
人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA 試劑盒 
人血管生成素1(ANG-1)ELISA 試劑盒
人Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)ELISA 試劑盒
人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒
人γ干擾素(IFN-γ)ELISA 試劑盒 
人25羥基維生素D3(25一OH—D3)ELISA 試劑盒
人Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA 試劑盒
人C-反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA 試劑盒
人Ⅰ型膠原吡啶交聯(lián)終肽（ICTP）ELISA 試劑盒
人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)ELISA 試劑盒
人乙酰膽堿受體抗體(AChR-Ab)ELISA 試劑盒
人5羥色胺(5-HT)ELISA 試劑盒
人Apelin ELISA 試劑盒
人纖溶酶原(Plg) ELISA 試劑盒
人抗組織轉(zhuǎn)谷氨酰胺酶抗體IgA(tTG-IgA)ELISA 試劑盒
人纖溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1) ELISA 試劑盒
人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA 試劑盒
人抗風(fēng)疹病毒IgM抗體(anti-RV IgM)ELISA 試劑盒
人抗繆勒管激素(AMH) ELISA 試劑盒
人補(bǔ)體3 (C3) ELISA 試劑盒
人H-鈣粘連蛋白（HCDH13）ELISA 試劑盒
人毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M2(M-AChRM2)ELISA 試劑盒
人抗麥膠蛋白(AGA)ELISA 試劑盒
人毒蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M1（M-AChRM1)ELISA 試劑盒
人I型膠原蛋白（COL-1）ELISA 試劑盒
G1(IgG1)ELISA 試劑盒
G2(IgG2)ELISA 試劑盒
(HCG)ELISA 試劑盒
人谷胱甘肽-過(guò)氧化物酶（GSH-PX）ELISA 試劑盒
人視黃醇結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISA 試劑盒
人解偶聯(lián)蛋白 2(UCP 2)ELISA 試劑盒
人可溶性腫瘤壞死因子-1（sTNF-1）ELISA 試劑盒
人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA 試劑盒
G(IgG)ELISA 試劑盒
人表皮生長(zhǎng)因子受體(EGF-R)ELISA 試劑盒
G3(IgG3)ELISA 試劑盒
人胰淀素(Amylin)ELISA 試劑盒
人β－內(nèi)啡肽（β－EP）ELISA 試劑盒
人Rho-A蛋白ELISA 試劑盒
人β2糖蛋白Ⅰ（β2GPⅠ）ELISA 試劑盒
人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA 試劑盒
人2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)ELISA 試劑盒
人α-銀環(huán)蛇毒素（α-BGT）ELISA 試劑盒
人X-連鎖遲發(fā)性脊椎骨骺發(fā)育不良（SEDL）ELISA 試劑盒
人Rho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激酶2(Rock-2)ELISA 試劑盒
人P53(P53)ELISA 試劑盒
M(IgM)ELISA 試劑盒
人P-糖蛋白（P-gp）ELISA 試劑盒
人載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒
人乳頭瘤病毒18抗體（HPV18）ELISA 試劑盒
人乳頭瘤病毒（HPV）ELISA 試劑盒
人前列腺分泌蛋白94(PSP94)ELISA 試劑盒
人前列腺素F2a(PGF2a)ELISA 試劑盒
人乳頭瘤病毒L1（HPVL1）抗體ELISA 試劑盒
人Klotho蛋白ELISA 試劑盒
人環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)ELISA 試劑盒
人前列環(huán)素(PGI)ELISA 試劑盒 
人抗角蛋白絲聚集素/絲集蛋白抗體(AFA)ELISA 試劑盒
人流行性出血熱IgG抗體(EHF IgG)ELISA 試劑盒
人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ(GRO-γ)ELISA試劑盒
人甘油三酯（TG）ELISA試劑盒
人流行性出血熱IgM抗體(EHF IgM)ELISA試劑盒
人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β(GRO-β)ELISA試劑盒
人10（HK10）ELISA試劑盒
人麻疹病毒(MV)ELISA 試劑盒
人溶菌酶（LZM）ELISA試劑盒
人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α(GRO-α)ELISA 試劑盒
人抗風(fēng)疹病毒IgG抗體(anti-RV IgG)ELISA 試劑盒
人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒
人超氧化物歧化酶(SOD)ELISA 試劑盒
人β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)ELISA 試劑盒
人熱休克蛋白27(HSP-27)ELISA試劑盒
人血管緊張素原(aGT)ELISA 試劑盒
人輪狀病毒抗原(RV Ag)ELISA試劑盒