人流行性乙腦IgM抗體(JE IgM)ELISA 試劑盒

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試劑盒名稱：人流行性乙腦IgM抗體(JE IgM)ELISA 試劑盒
規(guī) 格：48T/96T
品牌：進(jìn)口/國產(chǎn)
產(chǎn)品的用途：僅供科研究使用！
特點：靈敏性高、特異性強、重復(fù)性好
服務(wù)：齊一生物所有的elisa試劑盒均免費代測，全程Elisa實驗技術(shù)指導(dǎo)，免費代做實驗。
運輸：全國各地快遞免費送貨上門

人流行性乙腦IgM抗體(JE IgM)ELISA 試劑盒

本試劑盒僅供研究使用
檢測范圍：歡迎或或索取原版說明書
zui低檢測限：歡迎或或索取原版說明書

有效期：6個月
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
說明
1．試劑盒保存：-20℃（較長時間不用時）；2-8℃（頻繁使用時）。
2．濃洗滌液低溫保存會有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
3．中、英文說明書可能會有不*之處，請以英文說明書為準(zhǔn)。
4．剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會對實驗結(jié)果造成任何影響。
實驗原理
用純化的抗體包被微孔板，制成固相載體，往包被抗該指標(biāo)抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、化的抗該指標(biāo)抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標(biāo)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1.         酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔）。
2.         標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3.         樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4.         標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5.         辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6.         標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7.         辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8.         底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9.         濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10.     終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。

 
10、標(biāo)本的采集及保存
1.         血清：全血標(biāo)本請于室溫放置2小時或4℃過了夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.         血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.         細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項檢測。
標(biāo)本的稀釋原則：
首先通過文獻(xiàn)檢索的方式了解待測樣本的大致含量，確定適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù)。只有稀釋至標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)，檢測的結(jié)果才是準(zhǔn)確的。稀釋的過程中，應(yīng)做好詳細(xì)的記錄。zui后計算濃度時，稀釋了“N”倍，標(biāo)本的濃度應(yīng)再乘以“N”。
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋原則：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為300 pg/ml，做系列倍比稀釋后，分別稀釋300 pg/ml，150 pg/ml，75 pg/ml，37.5 pg/ml，18.5 pg/ml，9 pg/ml，4.5 pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制150 pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml（不要少于0.5ml）300 pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。
標(biāo)記抗體的稀釋原則：
臨用前以標(biāo)記抗體稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl標(biāo)記抗體加990μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。
辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素的稀釋原則：
臨用前以辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制（每孔100μl），實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素加990μl辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。
操作步驟
實驗開始前，請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性，每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液 100μl（取1μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同標(biāo)記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.         依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
注：
1. 用戶在初次使用試劑盒時，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實驗留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗時將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請依據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。

洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

人流行性乙腦IgM抗體(JE IgM)ELISA 試劑盒

計算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)（對數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（普通坐標(biāo)），在半對數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。

注意事項
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請先稀釋后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時，請以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。  

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人腸脂肪酸結(jié)合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒    Human intestinal fatty acid binding protein,iFABP ELISA試劑盒
大鼠一氧化氮(NO)ELISA試劑盒    Rat nitric oxide,NO ELISA試劑盒
人氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒     Human oxidized lowdensity lipoprotein,OxLDL ELISA試劑盒 
人骨髓抑制因子1(MPIF-1/CCL23)ELISA試劑盒    Human Myeloid Progenitor Inhibitory Factor 1,MPIF-1 ELISA試劑盒
人脂聯(lián)素(ADP)ELISA試劑盒     Human adiponectin,ADP ELISA試劑盒 
人組胺(HIS)ELISA試劑盒    human Histamine,HIS ELISA試劑盒 
人抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒     human Resistin ELISA試劑盒 
人骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)ELISA試劑盒    Human Bone-specific Alkphase B,ALP-B ELISA試劑盒
人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒    Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA試劑盒
人骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)ELISA試劑盒    Human Osteocalcin/Bone gla protein,OT/BGP ELISA試劑盒
人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒    Human soluble receptor activator of nuclear factor-kB ligand,sRANKL ELISA試劑盒
人1,25二羥基維生素D3(1,25-(OH)2D3/DVD/DHVD 3)ELISA試劑盒    Human 1,25-dihydroxyvitamin D3,DVD/DHVD 3 ELISA試劑盒
人組蛋白H2b(histon-H2b)ELISA試劑盒    Human histon-H2b ELISA試劑盒
人骨保護(hù)素(OPG)ELISA試劑盒     Human Osteoprotegerin,OPG ELISA試劑盒 
人骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)ELISA試劑盒    Human Bone morphogenetic protein receptor Ⅱ,BMPR-Ⅱ ELISA試劑盒
人骨成型蛋白受體1A(BMPR-1A)ELISA試劑盒    Human Bone morphogenetic protein receptor 1A,BMPR-1A ELISA試劑盒
人骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA試劑盒    Human Bone morphogenetic protein 4,BMP-4 ELISA Ki
人骨成型蛋白2(BMP-2)ELISA試劑盒    Human Bone morphogenetic protein 2,BMP-2 ELISA試劑盒
人環(huán)磷酸腺苷(cAMP)ELISA試劑盒    Human cyclic adenosine monophosphate,cAMP ELISA試劑盒
人甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒    Human mannan binding lectin associated serine protease,MASP ELISA試劑盒
人周期素依賴性激酶7(CDK-7)ELISA試劑盒    Human Cyclin-dependent kinase 7,CDK-7 ELISA試劑盒
人周期素依賴性激酶2(CDK-2)ELISA試劑盒    Human Cyclin-dependent kinase 2,CDK-2 ELISA試劑盒
人周期素依賴性激酶1(CDK-1)ELISA試劑盒     Human Cyclin-dependent kinase 1,CDK-1 ELISA試劑盒
人磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒    Human Phosphorylated adenosine monophosphate activated protein kinase,AMPK ELISA試劑盒
人乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒     Human Lactate Dehydrogenase,LDH ELISA試劑盒 
人解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒    Human A Disintegrin And Metalloprotease 9,ADAM9 ELISA試劑盒 
人β位淀粉樣前體蛋白裂解酶2(BACE2)ELISA試劑盒    Human beta-site APP-cleaving enzyme 2,BACE2 ELISA試劑盒
人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)ELISA試劑盒    human uridine phosphorylase 1,UPP1 ELISA試劑盒
人乙醇脫氫酶(ADH)ELISA試劑盒    Human alcohol dehydrogenase,ADH ELISA試劑盒
人乙醛脫氫酶(ALDH)ELISA試劑盒    Human aldehyde dehydrogenase,ALDH ELISA試劑盒
人Rho家族GTP酶1(RND1)ELISA試劑盒    human Rho family GTPase 1,RND1 ELISA試劑盒
人受體TNFRSF結(jié)合激酶2(RIPK2)ELISA試劑盒    human receptor TNFRSF-interacting serine-threonine kinase 2,RIPK2 ELISA試劑盒
人磷脂爬行酶1(PLSCR1)ELISA試劑盒    human phospholipid scramblase 1,PLSCR1 ELISA試劑盒
人3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A合酶1(HMGCS1)ELISA試劑盒    human 3-hydroxy-3-methylglutaryl-Coenzyme A synthase 1,HMGCS1 ELISA試劑盒
人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)ELISA試劑盒    human eosinophil-associated ribonuclease A family member 12,EAR12 ELISA試劑盒
人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3(EAR3)ELISA試劑盒    human eosinophil-associated ribonuclease A family member 3,EAR3 ELISA試劑盒
人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)ELISA試劑盒    human eosinophil-associated ribonuclease A family member 2 ELISA試劑盒