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品 牌
廠商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海市
更新時間:2021-12-23 09:15:48瀏覽次數(shù):238次
聯(lián)系我時,請告知來自 環(huán)保在線表達(dá)SV40T抗原人胚腎上皮細(xì)胞 293FT
CIK草魚腎臟細(xì)胞產(chǎn)品運(yùn)輸方式:干冰或者活體細(xì)胞運(yùn)輸,本公司會保證細(xì)胞運(yùn)輸中的存活率本公司細(xì)胞株低價保證質(zhì)量,免費(fèi)快遞直達(dá)。本公司擁有的專業(yè)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)人員為您的細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備詳細(xì)的技術(shù)咨詢。齊一生物科技(上海)有限公司: 60348496。Web:www.qiyibio。。com
CIK草魚腎臟細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)方法
1、收到細(xì)胞,請查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過程中的問題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來,顯微鏡下觀察會出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時,請不要打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時多數(shù)細(xì)胞會重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時如無異常情況 ,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時之需。
5 、24小時后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml 0.25%含EDTA的*消化,消化時間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動瓶壁,見細(xì)胞脫落下來,加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過稀,有些生長較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無菌操作。換液時,換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度 5%CO2 培養(yǎng)
7. 收到細(xì)胞后,請鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請離心收集細(xì)胞,接種到一個新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無機(jī)成分、激素、生長因子與微量元素)、細(xì)胞生長添加劑、抗生素/抗菌素溶液或*/*(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
BYP 瓊脂培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g/瓶 詢價
布氏菌疫苗培養(yǎng)基(液體) 1 萬 ml/袋 詢價
布氏活菌苗培養(yǎng)基(含瓊脂) 250g/瓶 詢價
雞副嗜血桿菌疫苗培養(yǎng)基 1 萬 ml/袋 詢價
鏈球菌疫苗培養(yǎng)基 1 萬 ml/袋 詢價
豬丹毒疫苗培養(yǎng)基 1 萬 ml/袋 詢價
豬肺疫疫苗培養(yǎng)基 1 萬 ml/袋 詢價
馬丁肉湯 250g/瓶 詢價
馬丁肉湯 1 萬 ml/袋 詢價
馬丁瓊脂 250g/瓶 詢價
仔豬副傷寒疫苗培養(yǎng)基 1 萬 ml/袋 詢價
改良 Minca 培養(yǎng)基基礎(chǔ) 250g/瓶 詢價
雞毒支原體疫苗培養(yǎng)基 1 萬 ml/袋 詢價
無菌輔酶Ⅰ(NAD)溶液 25mg×10 支/盒 詢價
無菌*溶液 80 萬單位×10 支/盒 詢價
MS 培養(yǎng)基MS 培地Murashige & Skoog Medium 250g/瓶
1Kg/袋
MS 培養(yǎng)基(1/2 蔗糖)MS 培地(1/2 ショ糖)Murashige & Skoog Medium (1/2 Sucrose) 250g/瓶
1Kg/袋
MS 培養(yǎng)基(1/2 蔗糖、不含瓊脂)MS 培地(1/2 ショ糖、寒天を含まない)Murashige & Skoog Medium Without Agar (1/2 Sucrose) 250g/瓶
1Kg/袋
1/2MS 培養(yǎng)基 250g/瓶
1KG/袋
1/2MS 培養(yǎng)基 100L/瓶
MS 大量元素Murashige & Skoog Macronutrients 100L/瓶
MS 微量元素Murashige & Skoog Micronutrients 500L/瓶
MS 維生素Murashige & Skoog Vitamins 500L/瓶
MS 培養(yǎng)基(不含瓊脂和蔗糖) 100L/瓶
MS 培養(yǎng)基(僅含大量元素與微量元素) 100L/瓶
Kassanis 培養(yǎng)基Kassanis 培地Kassanis Medium 250g/瓶
1Kg/袋
N6 培養(yǎng)基N6 培地N6 Medium 250g/瓶
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N6 培養(yǎng)基(不含蔗糖和瓊脂) 100L/瓶
B5 培養(yǎng)基B5 培地B5 Medium 250g/瓶
1Kg/袋
B5 培養(yǎng)基 1Kg/袋
B5 培養(yǎng)基B5 培地B5 Medium 250g/瓶
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White 培養(yǎng)基ワイト培地White Medium 250g/瓶
1Kg/袋
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