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MRC-5人胚肺成纖維細胞一、細胞操作參考書
二、生長特性：貼壁    懸浮
三、細胞生長條件：
培養(yǎng)基                  90%              （GIBCO）
血清              10%  FBS（GIBCO）
溫度                       37℃
空氣條件      5% CO2，,95% AIR
生長代數(shù)    P4
凍存條件    培養(yǎng)基70%、血清20%、DMSO10%
四、組成：
組份    規(guī)格
細胞一瓶    T25
細胞培養(yǎng)與操作說明    1份
五、細胞接收后的操作流程與注意事項
1.如果細胞為貼壁細胞，，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加15%血清的*培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的*培養(yǎng)基，培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增殖而是繼續(xù)脫落死亡，請及時實驗室，技術(shù)人員會跟進解決
2.貼壁細胞生長緩慢：適當提高血清濃度（zui高不能超過20%），或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮*消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)
3.生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)
六、細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程（請嚴格遵照無菌操作）
1．吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml  0.25%*進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在1-2min）
2．鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ?，加6~8ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散
3．取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)?培養(yǎng)基，，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)
4．注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%以后重復(fù)1項操作或者凍存
特別注意：（如使用公共實驗室或初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng)）
1.收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶培養(yǎng)基，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清（原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間zui長不宜超過72小時）
2.貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞放置培養(yǎng)箱孵育過夜到第二天再做消化傳代
如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并實驗室
qy-xb-834    小鼠白血病細胞    C3    
qy-xb-835    小鼠β胰島素瘤細胞    RIN-m5F    
qy-xb-836    小鼠自發(fā)高乳腺癌細胞    TA2    
qy-xb-837    小鼠淋巴瘤細胞    Nb2－11    
qy-xb-838    小鼠骨髓瘤細胞    NS-1    
qy-xb-839    小鼠腎癌細胞    Kert-3    
qy-xb-840    HPVl6 E6、E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL／C(H-2b)小鼠肺上皮細胞    TC-1    
qy-xb-841    長臂猿淋巴瘤    MLA-144    人子宮內(nèi)膜腺癌細胞    RL95-2 
人胰腺癌細胞    PANC-1 
人肺癌細胞    PC-9（PC9）
人轉(zhuǎn)移胰腺癌細胞    AsPC-1
人急性非B非T淋巴細胞白血病細胞    Reh
人肺癌細胞    MSTO-211H
人肺成纖維樣細胞    HLF
人B淋巴瘤細胞    Farage
人肺癌細胞    NCI-H596
人肺鱗癌細胞    SK-MES-1
人結(jié)腸癌細胞    RKO
人鼻咽癌細胞    SUNE-1亞株-6-10B
人胚腎細胞    293A
人神經(jīng)母細胞瘤細胞    SK-N-SH
人非小細胞肺癌細胞    NCI-H358
人肺腺癌細胞    NCI-H1975
人巨核細胞白血病細胞    DAMI
人支氣管上皮細胞    HBE
人膠質(zhì)母細胞瘤細胞    A172
人膀胱移行細胞乳頭瘤細胞    RT4
人乳腺腺癌細胞    MDA-MB-436
大鼠心肌細胞    H9C2(2-1)
小鼠肝上皮細胞    NCTC clone 1469 [derivative of NCTC 721
馬-達二氏犬腎細胞系    MDCK (NBL-2)
豬鼻甲黏膜成纖維細胞    PT-K75
小鼠胰腺癌細胞    LTPA
大鼠胰腺癌細胞    DSL-6A/C1 
小鼠骨髓瘤B淋巴細胞    SP2/MIL-6
大鼠腦間質(zhì)細胞    DI TNC1
小鼠肌原細胞    C2C12
小鼠胚胎成纖維細胞    3T3-L1
大鼠回腸細胞    IEC-18
非洲綠猴腎細胞    VERO C1008 [Vero 76, clone E6, Vero E6] 
小鼠骨髓瘤細胞    Sp2/0-Ag14
鴨子胚胎成纖維細胞     Duck embryo
雞胚胎成纖維細胞    UMNSAH/DF-1
小鼠巨噬細胞    RAW 264.7
倉鼠腎成纖維細胞    YXK-21
小鼠表皮細胞    JB6 Cl 30-7b
小鼠胚胎細胞    NIH/3T3
小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞    EOMA
小鼠胚胎纖維細胞    STO 
大鼠肝上皮樣干細胞    WB-F344
                
大兔呼吸系統(tǒng)原代細胞                
貨號    名稱    細胞數(shù)    規(guī)格    
qy-xb-841    肺大動脈內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-842    肺大動脈平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-843    肺大靜脈內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-844    肺大靜脈平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-845    肺動脈成纖維細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-846    肺泡上皮細胞    5 ×105    1ml    
qy-xb-847    氣管上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-848    肺微血管內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-849    肺成纖維細胞    5 × 105    1ml    
                
大兔循環(huán)系統(tǒng)原代細胞                
貨號    名稱    細胞數(shù)    規(guī)格    
qy-xb-849    心肌細胞    5 ×105    1ml    
qy-xb-850    心肌成纖維細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-851    主動脈內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-852    主動脈平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-853    單核細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-854    大隱靜脈平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
                
大兔消化系統(tǒng)原代細胞                
貨號    名稱    細胞數(shù)    規(guī)格    
qy-xb-854    食管上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-855    食管平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-856    腸動脈內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-857    腸靜脈內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-858    腸平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-859    腸粘膜上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-860    肝實質(zhì)細胞    5 ×105    1ml    
qy-xb-861    肝動脈內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-862    肝動脈平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-863    肝內(nèi)膽管上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-864    胃黏膜上皮    5 × 105    1ml                    
大兔泌尿系統(tǒng)原代細胞                
貨號    名稱    細胞數(shù)    規(guī)格    
qy-xb-864    腎實質(zhì)細胞    5 ×105    1ml    
qy-xb-865    腎系膜細胞    5 ×105    1ml    
qy-xb-866    膀胱上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-867    膀胱平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-868    腎動脈內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-869    腎動脈平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-870    腎小管上皮細胞    5 × 105    1ml    
大兔骨、關(guān)節(jié)、軟組織、皮膚系統(tǒng)原代細胞                
貨號    名稱    細胞數(shù)    規(guī)格    
qy-xb-870    骨細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-871    滑膜細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-872    骨骼肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-873    表皮角化細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-874    真皮成纖維細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-875    軟骨細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-876    成骨細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-877    破骨細胞    5 × 105    1ml                    
大兔腦和神經(jīng)系統(tǒng)原代細胞                
貨號    名稱    細胞數(shù)    規(guī)格    
qy-xb-877    腦動脈血管內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-878    腦靜脈血管平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-879    腦靜脈血管內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-880    腦動脈血管平滑肌細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-881    腦膜細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-882    神經(jīng)元細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-883    神經(jīng)膠質(zhì)細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-884    腦微血管內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
大兔眼、耳、鼻、喉、口腔系統(tǒng)原代細胞                
貨號    名稱    細胞數(shù)    規(guī)格    
qy-xb-884    眼晶狀體上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-885    視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-886    小梁網(wǎng)細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-887    視網(wǎng)膜色素上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-888    視網(wǎng)膜muller細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-889    虹膜色素上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-890    角膜上皮細胞    5 × 105    1ml    
qy-xb-891    角膜內(nèi)皮細胞    5 × 105    1ml    
人子宮內(nèi)膜腺癌細胞    RL95-2 
人胰腺癌細胞    PANC-1 
人肺癌細胞    PC-9（PC9）
人轉(zhuǎn)移胰腺癌細胞    AsPC-1
人急性非B非T淋巴細胞白血病細胞    Reh
人肺癌細胞    MSTO-211H
人肺成纖維樣細胞    HLF
人B淋巴瘤細胞    Farage
人肺癌細胞    NCI-H596
人肺鱗癌細胞    SK-MES-1
人結(jié)腸癌細胞    RKO
人鼻咽癌細胞    SUNE-1亞株-6-10B
人胚腎細胞    293A
人神經(jīng)母細胞瘤細胞    SK-N-SH
人非小細胞肺癌細胞    NCI-H358
人肺腺癌細胞    NCI-H1975
人巨核細胞白血病細胞    DAMI
人支氣管上皮細胞    HBE
人膠質(zhì)母細胞瘤細胞    A172
人膀胱移行細胞乳頭瘤細胞    RT4
人乳腺腺癌細胞    MDA-MB-436
大鼠心肌細胞    H9C2(2-1)
小鼠肝上皮細胞    NCTC clone 1469 [derivative of NCTC 721
馬-達二氏犬腎細胞系    MDCK (NBL-2)
豬鼻甲黏膜成纖維細胞    PT-K75
小鼠胰腺癌細胞    LTPA
大鼠胰腺癌細胞    DSL-6A/C1 
小鼠骨髓瘤B淋巴細胞    SP2/MIL-6
大鼠腦間質(zhì)細胞    DI TNC1
小鼠肌原細胞    C2C12
小鼠胚胎成纖維細胞    3T3-L1
大鼠回腸細胞    IEC-18
非洲綠猴腎細胞    VERO C1008 [Vero 76, clone E6, Vero E6] 
小鼠骨髓瘤細胞    Sp2/0-Ag14
鴨子胚胎成纖維細胞     Duck embryo
雞胚胎成纖維細胞    UMNSAH/DF-1
小鼠巨噬細胞    RAW 264.7
倉鼠腎成纖維細胞    YXK-21
小鼠表皮細胞    JB6 Cl 30-7b
小鼠胚胎細胞    NIH/3T3
小鼠血管內(nèi)皮瘤細胞    EOMA
小鼠胚胎纖維細胞    STO 
大鼠肝上皮樣干細胞    WB-F344