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當(dāng)前位置:齊一生物科技(上海)有限公司>>技術(shù)文章>>大鼠嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)試劑盒使用說明
本試劑僅供研究使用 目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關(guān)液體樣本中嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)的含量。
實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)水平。用純化的嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入嘌呤核苷磷酸化酶(PNP),再與 HRP 標(biāo)記的嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在 450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中大鼠嘌呤核苷磷酸化酶(PNP)濃度。
注意事項:
1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30 分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2. 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間盡量控制在 5 分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本 OD 值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6. 底物請避光保存。
7. 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準(zhǔn)。
試劑盒性能:
1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù) R 值為 0.92 以上。
2.批內(nèi)與批間應(yīng)分別小于 9%和 15%
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