真核細(xì)胞有著復(fù)雜的修復(fù)系統(tǒng)以確保核酸代謝的正常進行。多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP-1）是動物細(xì)胞中與DNA修復(fù)和蛋白質(zhì)翻譯后修飾密切相關(guān)的一種蛋白酶。PARP-1通過識別結(jié)構(gòu)損傷的DNA片段而被激活，在受體蛋白表面進行翻譯后修飾，有助于修復(fù)蛋白的結(jié)合而進行DNA損傷修復(fù)。因此阻斷腫瘤細(xì)胞中的DNA修復(fù)通路是目前腫瘤治療的一種新的有效途徑。通過抑制PARP-1的活性，可以阻礙DNA修復(fù)，加速細(xì)胞的不穩(wěn)定，從而達(dá)到殺死腫瘤細(xì)胞的目的。因此PARP-1活性分析及其抑制劑篩選在癌癥分析及抗癌藥物研發(fā)等領(lǐng)域有重要意義。
科學(xué)家利用陽離子共軛聚合物和超電荷綠色熒光蛋白（scGFP）之間的熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）現(xiàn)象，開發(fā)了一種簡單且無標(biāo)記的PARP-1活性分析及其抑制劑評估方法。激活后的PARP-1可自修飾具有大量負(fù)電荷的聚ADP核糖，其通過靜電作用可吸引陽離子共軛聚合物和正電荷scGFP之間相互靠近，從而后二者之間可發(fā)生有效的FRET，并通過比例型熒光信號實現(xiàn)了PARP酶活性的靈敏定量檢測。與傳統(tǒng)方法比較，該方法操作簡單，無需修飾，通用性強，靈敏度高，提供了一種篩選PARP-1抑制劑及抗癌藥物的新策略，在相關(guān)抗癌藥物篩選等方面有較好的潛在應(yīng)用前景。
 
原文檢索：A poly(ADP-ribose) polymerase-1 activity assay based on the FRET between a cationic conjugated polymer and supercharged green fluorescent protein