實驗細節(jié):酶標板穩(wěn)定性的判斷
酶標板作為ELISA檢測實驗中的輔材,起著舉足輕重的作用并直接影響zui終實驗結果,酶標板的好壞主要取決于其對蛋白吸附的靈敏度、板孔間蛋白吸附能力差異以及所采購酶標板批次間的差異。因此,選擇一款蛋白吸附靈敏度高、對蛋白吸附能力孔間差異小、批次間差異小的酶標板產品,是實驗者獲得可靠、穩(wěn)定實驗結果的保障。
根據(jù)孔數(shù),可分為96孔、48孔等,由于酶標板主要是配合酶標儀用,目前市面上的酶標儀zui多為96孔,因此酶標板zui為常用的也是96孔。
酶標板性能判斷:
良好的酶標板應該是吸附性能好,空白值低,孔底透明度高,各板之間、同一板各孔之間性能相近。酶標板由于原料的不同和制作工藝的差別,各種產品的質量差異很大,因此,每一批號的酶標板在使用前須事先檢查其性能。
常用的檢查方法為:以一定濃度的人IgG(一般為10ng/ml)包被ELISA板各孔,洗滌后每孔內加入適當稀釋度的酶標抗人IgG抗體,保溫后洗滌,加底物顯色,終止酶反應后,分別測每孔溶液的吸光度??刂品磻獥l件,使各孔讀數(shù)在吸光度0.8左右。計算全部讀數(shù)的平均值。所有單個讀數(shù)與全部讀數(shù)的均數(shù)之差,應小于10%。
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