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832次在小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子12(FGF12)ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時(shí)間,這一保溫過(guò)程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。
ELISA屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會(huì),只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的過(guò)程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點(diǎn)。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時(shí)間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實(shí)驗(yàn)室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子12(FGF12)ELISA試劑盒方法作反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究時(shí),實(shí)驗(yàn)表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時(shí),產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗(yàn)在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測(cè)定中多使反應(yīng)在冰箱中過(guò)夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時(shí)間太長(zhǎng),在小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子12(FGF12)ELISA試劑盒中一般不予采用。
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時(shí)候更應(yīng)如此。無(wú)論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng),操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時(shí)可根據(jù)說(shuō)明書的要求控制溫育。室溫溫育時(shí),ELISA板只要平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn),一個(gè)人操作時(shí),一次不宜多于兩塊板同時(shí)測(cè)定。
小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子12(FGF12)ELISA試劑盒檢測(cè)方法簡(jiǎn)單,靈敏度高,我個(gè)人覺得ELISA檢測(cè)血清或者培養(yǎng)上清的細(xì)胞因子、胰島素、激素等分泌型的小分子蛋白的定量檢測(cè);病原體抗原的定性與定量;評(píng)估自己制備的血清抗體的效價(jià)等。好多客戶有個(gè)誤區(qū),拿來(lái)一個(gè)指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測(cè),我還是建議多動(dòng)腦,該檢測(cè)活性的檢測(cè)活性,該做western的做western。
xy-E10063 人CXC趨化因子配體16(CXCL16)ELISA試劑盒96t/48t Human CXC-chemokine ligand 16,CXCL16 ELISAkit
xy-E10064 人CXC趨化因子受體3(CXCR3)ELISA試劑盒96t/48t Human CXC-chemokine receptor 3,CXCR3 ELISAkit
xy-E10065 人γ干擾素誘導(dǎo)蛋白16/p16(IFI16/p16)ELISA試劑盒96t/48t Human interferon-inducible protein 16,IFI16/p16 ELISAkit
xy-E10066 人基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA試劑盒96t/48t Human Stromal cell derived factor 1a,SDF-1a ELISAkit
xy-E10067 人淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)ELISA試劑盒96t/48t Human lymphotactin,Lptn/LTN ELISAkit
xy-E10068 人α干擾素(IFN-α)ELISA試劑盒96t/48t Human Interferon α,IFN-α ELISAkit
xy-E10069 人可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA試劑盒96t/48t Human soluble Cluster of differentiation 86,sCD86 ELISAkit
xy-E10070 人白介素27(IL-27)ELISA試劑盒96t/48t human Interleukin 27,IL-27 ELISAkit
xy-E10071 人白介素23(IL-23)ELISA試劑盒96t/48t Human Interleukin 23,IL-23 ELISAkit
xy-E10072 人巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子(MIF)ELISA試劑盒96t/48t Human Macrophage Migration Inhibitory Factor,MIF ELISAkit
xy-E10073 人組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISA試劑盒96t/48t Human Tissue factor pathway inhibitor,TFPI ELISAkit
xy-E10074 人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)ELISA試劑盒96t/48t Human interferon-inducible protein 10,IP-10 ELISAkit
xy-E10075 人白介素1(IL-1)ELISA試劑盒96t/48t Human Interleukin 1,IL-1 ELISAkit
xy-E10076 人白介素17(IL-17)ELISA試劑盒96t/48t Human Interleukin 17,IL-17 ELISAkit
xy-E10077 人白介素1β (IL-1β)ELISA試劑盒96t/48t Human Interleukin 1β,IL-1β ELISAkit
xy-E10078 人表皮生長(zhǎng)因子(EGF)ELISA試劑盒96t/48t Human Epidermal growth factor,EGF ELISAkit
xy-E10079 人堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)ELISA試劑盒96t/48t Human basic fibroblast growth factor,bFGF ELISAkit
xy-E10080 人巨噬細(xì)胞炎性蛋白5(MIP-5)ELISA試劑盒96t/48t Human macrophage inflammatory protein 5,MIP-5 ELISAkit
xy-E10081 人可溶性E選擇素(sE-selectin)ELISA試劑盒96t/48t Human soluble E-selectin,sE-selectin ELISAkit
xy-E10082 人可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒96t/48t Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1,sICAM-1
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