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在小鼠成纖維細(xì)胞生長因子11(FGF11)ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng),即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后??乖贵w反應(yīng)的完成需要有一定的溫度和時間,這一保溫過程稱為溫育(incubation),有人稱之為孵育,在ELISA中似不恰當(dāng)。
ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結(jié)合的機(jī)會,只有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程,因此需經(jīng)擴(kuò)散才能達(dá)到反應(yīng)的終點。在其后加入的酶標(biāo)記抗體與固相抗原的結(jié)合也同樣如此。這就是為什么ELISA反應(yīng)總是需要一定時間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數(shù)抗原抗體結(jié)合的合適溫度。在建立小鼠成纖維細(xì)胞生長因子11(FGF11)ELISA試劑盒方法作反應(yīng)動力學(xué)研究時,實驗表明,兩次抗原抗體反應(yīng)一般在37℃經(jīng)1-2小時,產(chǎn)物的生成可達(dá)。為加速反應(yīng),可提高反應(yīng)的溫度,有些試驗在43℃進(jìn)行,但不宜采用更高的溫度??乖贵w反應(yīng)4℃更為*,在放射免疫測定中多使反應(yīng)在冰箱中過夜,以形成zui多的沉淀。但因所需時間太長,在小鼠成纖維細(xì)胞生長因子11(FGF11)ELISA試劑盒中一般不予采用。
保溫的方式除有的ELISA儀器附有特制的電熱塊外,一般均采用水浴,可將ELISA板置于水浴箱中,ELISA板底應(yīng)貼著水面,使溫度迅速平衡。為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱,ELISA板應(yīng)放在濕盒內(nèi),濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui后將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應(yīng)如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應(yīng)板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應(yīng),操作時的室溫應(yīng)嚴(yán)格限制在規(guī)定的范圍內(nèi),標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20-25℃,但具體操作時可根據(jù)說明書的要求控制溫育。室溫溫育時,ELISA板只要平置于操作臺上即可。應(yīng)注意溫育的溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。為保證這一點,一個人操作時,一次不宜多于兩塊板同時測定。
小鼠成纖維細(xì)胞生長因子11(FGF11)ELISA試劑盒檢測方法簡單,靈敏度高,我個人覺得ELISA檢測血清或者培養(yǎng)上清的細(xì)胞因子、胰島素、激素等分泌型的小分子蛋白的定量檢測;病原體抗原的定性與定量;評估自己制備的血清抗體的效價等。好多客戶有個誤區(qū),拿來一個指標(biāo)就想當(dāng)然地嘗試用ELISA去檢測,我還是建議多動腦,該檢測活性的檢測活性,該做western的做western。
xy-E10048 人神經(jīng)保護(hù)因子(CVNPF)ELISA試劑盒96t/48t Human Cobra venom neuronal protective factor,CVNPF ELISAkit
xy-E10049 人可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒96t/48t Human soluble Tumor Necrosis Factorαreceptor,sTNFαR
ELISAkit
xy-E10050 人可溶性細(xì)胞因子受體(sCKR)ELISA試劑盒96t/48t Human soluble cytokine receptor,sCKR ELISAkit
xy-E10051 人可溶性凋亡相關(guān)因子配體(sFASL)ELISA試劑盒96t/48t Human soluble Factor-related Apoptosis ligand,sFASL/Apo-1
ELISAkit
xy-E10052 人細(xì)胞凋亡抑制因子(IAP)ELISA試劑盒96t/48t Human inhibitor of apoptosis,IAP ELISAkit
xy-E10053 人集落刺激因子(CSF)ELISA試劑盒96t/48t Human colony-stimulating factor,CSF ELISAkit
xy-E10054 人γ干擾素誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子(MIGF/CXCL9)ELISA試劑盒96t/48t Human monocyte interferon gamma inducing factor,MIGF
ELISAkit
xy-E10055 人干擾素誘導(dǎo)T細(xì)胞趨化因子(ITAC/CXCL11)ELISA試劑盒96t/48t Human Interferon inducible T-cell Chemoattractant,I-
TAC ELISAkit
xy-E10056 人CD14分子(CDl4)ELISA試劑盒96t/48t Human cluster Of differentiation,CDl4 ELISAkit
xy-E10057 人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)ELISA試劑盒96t/48t Human apoptosis inducing factor,AIF ELISAkit
xy-E10058 人白細(xì)胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒96t/48t Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISAkit
xy-E10059 人CD4分子(CD4)ELISA試劑盒96t/48t Human cluster Of differentiation,CD4 ELISAkit
xy-E10060 人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白(P-cad)ELISA試劑盒96t/48t Human Placenta Cadherin,P-cad ELISAkit
xy-E10061 人角化細(xì)胞生長因子(KGF)ELISA試劑盒96t/48t Human Keratinocyte Growth Factor,KGF ELISAkit
xy-E10062 人血小板衍生生長因子BB(PDGF-BB)ELISA試劑盒96t/48t Human Plaet-Derived Growth Factor-BB,PDGF-BB
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