全基因擴(kuò)增預(yù)配液 人線粒體基因組的特點(diǎn)： 1、人線粒體基因組為16，569bp的雙鏈閉環(huán)分子，一條鏈為重鏈(H鏈)，一條鏈為輕鏈(L鏈)，兩條鏈均有編碼功能，每個(gè) mtDNA分于編碼13種蛋白質(zhì)和24種結(jié)構(gòu)RNA(22rRNA，2tRNA)． 2、線粒體DNA為母系遺傳． 3、結(jié)構(gòu)基因不含內(nèi)含子，部分區(qū)域有基因重疊，因此病理性mtDNA突變更易發(fā)生． 4、mtDNA突變頻率更高． 5、線粒體DNA突變的表型表達(dá)與核DNA不同。 第四節(jié) 細(xì)菌和病毒基因組

一、細(xì)菌基因組的特點(diǎn)。 1．功能相關(guān)的幾個(gè)結(jié)構(gòu)基因往往***在—起，受它們上游的共同調(diào)控區(qū)控制，形成操縱子結(jié)構(gòu)， 2．結(jié)構(gòu)基因中沒有內(nèi)含子，也無重疊現(xiàn)象。 3．細(xì)菌DNA大部分為編碼序列。

二、病毒基因組的特點(diǎn) 1．每種病毒只有一種核酸，或者DNA，或者RNA； 2．病毒核酸大小差別很大，3X103一3X106bp； 3．除逆病毒外，所有病毒基因都是單拷貝的。 4．大部份病毒核酸是由一條雙鏈或單鏈分子(RNA或DNA)，僅少數(shù)RNA病毒由幾個(gè)核酸片段組成． 5．真核病毒基因有內(nèi)含子，而噬菌體（感染細(xì)菌的病毒）基因中無內(nèi)含子． 6．有重疊基因．全基因擴(kuò)增預(yù)配液

轉(zhuǎn)錄后加工在細(xì)胞核內(nèi)對(duì)基因產(chǎn)物(mRNA前體)進(jìn)行各種修飾、剪接和編輯，使編碼蛋白質(zhì)的外顯子部分連接成為一個(gè)連續(xù)的開放讀 框(open reading frame，ORF)的過程稱為轉(zhuǎn)錄后加工．一、mRNA前體加工的分子機(jī)制 - 核內(nèi)mRNA前體—異質(zhì)性核RNA(heterogeneous nuclear RNA，hnRNA)， hnRNA與蛋白質(zhì)結(jié)合形成核異質(zhì)性核糖核蛋白(hnRNP), mRNA前體的加工在hnRNP上進(jìn)行． (一)5’-端加帽(capping) —mRNA前體的5’-端加甲基化鳥苷(m7pppN) 5’端m7G帽子結(jié)構(gòu)的作用： 1．使mRNA更穩(wěn)定 2．增加蛋白質(zhì)合成的效率 3．帽子結(jié)構(gòu)對(duì)mRNA前體的剪接是必需的（二)3’-端接多聚腺苷(poly(A)) —在mRNA前體3’端接上一個(gè)約200—250個(gè)腺嘌呤核苷酸(A)的尾巴。 poly(A)尾巴的作用： 1．有利于mRNA通過核孔； 2．參與穩(wěn)定mRNA；全基因擴(kuò)增預(yù)配液 3．增強(qiáng)翻譯效率。（三)mRNA前體的剪接剪接(sp!icing)—剪除內(nèi)含子，并將外顯子連接 1．真核內(nèi)含子的序列特征：真核內(nèi)含子總是由Gu開始，以AG結(jié)束，內(nèi)含子的5’-端剪接點(diǎn)(供位)和3’-端剪接點(diǎn)(受位)， 以及內(nèi)含子中的一個(gè)內(nèi)部序列分支點(diǎn)（branch site)是mRNA前體正確剪接所必需的。 2．mRNA前體的剪接機(jī)制 -剪接過程由二步連續(xù)的轉(zhuǎn)酯反應(yīng)組成．該過程中產(chǎn)生一個(gè)套索狀中間體（ lariat intermediate)，結(jié)果使2個(gè)原先被分隔的外顯子連接。 3．剪接體(spliceosome) 細(xì)胞核內(nèi)的小分子RNA(一般≤300堿基)—SnRNA（small nuclear RNA)，包括U1—U6等。 snRNA與特異的蛋白質(zhì)形成復(fù)合物-SnRNP．mRNA前體與snRNP形成的復(fù)合物—剪接體．mRNA前體的剪接通過剪接 體進(jìn)行。

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