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更新時(shí)間:2018-01-13 22:05:26瀏覽次數(shù):193次
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人前列環(huán)素(PGI)ELISA試劑盒
【試驗(yàn)所需自備試驗(yàn)耗材及試劑】
1. 離心管(容量為1.5ml,5ml等)。
2. 一次性吸頭(量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
3. 純凈水或蒸餾水。
4. 坐標(biāo)紙。
5. 吸水紙。
6. EDTA,*,肝素
【標(biāo)本收集注意事項(xiàng)】
1. 收集血液的試管應(yīng)為一次性的無熱原,無內(nèi)毒素試管。
2. 血清和血漿避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。
3. 標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。
4. 標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測,需按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-80℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融。
5. 可根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù)) 。
6. 收集標(biāo)本,盡量做到雙份的用量,避免一次實(shí)驗(yàn)失敗,重復(fù)實(shí)驗(yàn)時(shí)標(biāo)本缺失,從而耽誤實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
7. 收集標(biāo)本時(shí),應(yīng)該做好防護(hù)措施(比如戴手套,口罩,護(hù)目鏡等),認(rèn)為所有標(biāo)本都具有一定的潛在危險(xiǎn)性。
8. 樣本處理應(yīng)該在生物安全柜里面,并且正確使用生物安全柜。
【人前列環(huán)素(PGI)ELISA試劑盒標(biāo)本處理辦法】
1. 血清:將采集的全血靜置冰箱4℃,然后1000-3000rpm離心10分鐘,取上清立即測試,暫時(shí)不測可以放入-20℃(1-3個(gè)月)或-80℃(3-6個(gè)月)保存。
2. 血漿:用EDTA,*,肝素等作為抗凝劑,加入血液混勻后,1000-3000rpm離
心10分鐘,取上清立即測試,暫時(shí)不測可以放入-20℃(1-3個(gè)月)或-80℃(3-6個(gè)月)
保存。
3. 組織勻漿:切取組織塊,0.01MPBS中過洗一次;按照1G組織加入5-10ml組織蛋白萃取試劑的比例,在冰水中勻漿。勻漿完成后,5000-10000rpm離心10分鐘,取上清立即測試,暫時(shí)不測可以放入-20℃(1-3個(gè)月)或-80℃(3-6個(gè)月)保存。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:1000-3000rpm離心10分鐘,取上清立即測試,暫時(shí)不測可以放入-20℃(1-3個(gè)月)或-80℃(3-6個(gè)月)保存。
5. 尿液,腹水,腦脊液等:1000-3000rpm離心10分鐘,取上清立即測試,暫時(shí)不測可以放入-20℃(1-3個(gè)月)或-80℃3-6個(gè)月)保存。
注:血清或血漿樣本凍存后聚合的蛋白會(huì)遮蓋抗原的表位,建議用樣品稀釋液將血清或血漿樣本做1:2稀釋后檢測。計(jì)算樣本含量時(shí)應(yīng)乘以稀釋倍數(shù)。
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