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*(OFLO)使用說明書
實驗原理
本試劑盒采用競爭ELISA 方法,在微孔板包被有*(OFLO)偶聯(lián)抗原,加入氧
氟沙星(OFLO)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離*(OFLO)與微孔條上預(yù)包被的*(OFLO)
偶聯(lián)抗原互相競爭抗*(OFLO)抗體酶標(biāo)記物,用TMB 底物顯色,加入終止液后
顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm 波長下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中*
(OFLO)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中*(OFLO)的含量。
*(OFLO)使用說明書
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9 酶免分析步驟
9.1 實驗須知
9.1.1 實驗開始前請將所有試劑于盒外充分恢復(fù)至室溫(25±2℃),時間約2小時?;販刂潦?br />溫(25±2℃)后再取出微孔條,多余的微孔條重新密封立即于2~8℃干燥保存
注:一定保證回溫充分,否則影響檢測的度和準(zhǔn)確度。
9.1.2 使用后請立即將試劑放回2~8℃保存
9.1.3 請不要改變分析程序
9.1.4 請使用的微量移液器
9.1.5 操作一旦開始,請不要中斷任何程序
9.1.6 ELISA結(jié)果的可重復(fù)性*程度的取決于操作程序,請嚴(yán)格按照要求操作
9.1.7 為避免交叉污染,每個標(biāo)準(zhǔn)品和樣品均應(yīng)使用不同的吸頭加樣
9.1.8 加樣時請勿讓吸頭接觸微孔中的溶液或內(nèi)表面
9.2 分析步驟
9.2.1 預(yù)*行編號,標(biāo)記B0、標(biāo)準(zhǔn)品和樣品的位置,*進(jìn)行雙孔檢測
9.2.2 取所需數(shù)量的微孔(微孔條可拆),將多余板條重新密封并立即放回2~8℃保存
9.2.3 樣品稀釋液(10×)、濃縮洗滌液(20×)稀釋成工作液(蒸餾水或去離子水稀釋)
9.2.4 在B0孔中加入50μl0.0 ng/ ml標(biāo)準(zhǔn)品溶液
9.2.5 在各標(biāo)準(zhǔn)孔中加入50μl的標(biāo)準(zhǔn)品溶液
9.2.6 在各樣品孔中加入50μl樣品溶液
9.2.7 在所有孔中加入50μl的抗*(OFLO)抗體酶結(jié)合物
9.2.8 輕輕晃動反應(yīng)板幾秒鐘。
9.3 37℃溫浴30min (溫浴過程中不時輕拍反應(yīng)板,可以減少雙孔誤差)
9.3.1 甩掉孔中液體,用洗液洗滌微孔板5次,zui后一次應(yīng)在吸水紙上拍打以*除去孔中液
3
體。
9.4 反應(yīng)
9.4.1 洗滌程序完成后,立即用微量移液器在每個微孔中先加入50μl顯色液A,再加 50μl顯
色液B;輕微晃動反應(yīng)板使之*混勻
9.4.2 37℃溫浴10min
9.4.3 每孔中加入50μl終止液,混勻
9.4.4 在450nm下檢測吸光度,結(jié)果在5min內(nèi)讀取。
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