人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒
ELISA試劑盒的基本原理就是將抗原抗體固定到特定的載體上進行反應(yīng),并通過酶催化底物發(fā)生化學(xué)變化將抗原抗體反應(yīng)通過顏色的形式顯現(xiàn)出來。
(1)將抗原抗體反應(yīng)固相化:即試驗中的包被環(huán)節(jié),使抗原或抗體吸附于固相載體表面。其機制可能是聚苯乙烯表面間的疏水基團可以無選擇性地吸附蛋白分子。此物理性吸附不破壞蛋白分子結(jié)構(gòu),保持其生物學(xué)特性和免疫學(xué)活性;
(2)封閉:固相吸附蛋白是非特異性的,在包被目的免疫蛋白后,未吸附蛋白的固相表面仍然有吸附其它蛋白的能力,為了保障抗原抗體反應(yīng)的特異性,因此,包被剩余的固相表面應(yīng)該用抗原抗體反應(yīng)無關(guān)蛋白封閉。一般認(rèn)為牛血清白蛋白是zui為理想的封閉劑,也可用脫脂奶粉、明膠、牛血清替代。
(3)抗原抗體反應(yīng):抗原或抗體在適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)下可進行特異的抗原抗體反應(yīng)。 (4)酶反應(yīng):酶可以通過共價鍵與抗原或抗體連接形成結(jié)合物,當(dāng)抗原抗體反應(yīng)的時候,被檢測靶目標(biāo)中也結(jié)合了酶分子。
(5)ELISA試劑盒底物反應(yīng):結(jié)合在抗原抗體中的酶分子,可以促使底物發(fā)生顏色反應(yīng),檢測人員可以裸眼觀察,可以通過顏色來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,通過顏色的深淺判斷標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的含量,也可借用酶標(biāo)儀在適當(dāng)?shù)牟ㄩL讀取吸光度值。
人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒的優(yōu)勢:
全面——混合8種不同的常見抗原,對自身免疫性疾病進行全面篩查。
快速——檢測時間短(~2小時),確診時間更早。
準(zhǔn)確——ELISA檢測方法,靈敏度高,特異性強,適用性好。
質(zhì)優(yōu)——*開發(fā),高品質(zhì)及高可靠性的分析性能。
價低——國內(nèi)自生產(chǎn),符合國內(nèi)實情,降低生產(chǎn)成本
標(biāo)本的采取和保存
可用作ELISA測定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗人乙型肝炎表面抗原(HBsAg)ELISA試劑盒凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗中均以血清作為檢測標(biāo)本。在ELISA中血漿和血清可同等應(yīng)用。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測定中,溶血標(biāo)本可能會增加非特異性顯色。
采取措施,避免差錯事故的發(fā)生:創(chuàng)造一個良好的工作環(huán)境,實驗窄工作人員應(yīng)團結(jié)友愛,相互關(guān)心,相互學(xué)習(xí),處在一個融洽和諧的氛圍中,自然心情舒暢,工作情緒高漲。再就是建立完善的質(zhì)量保證體系,在操作過程中時刻注意,將質(zhì)控貫穿到整個實驗過程,包括標(biāo)本的采集與處理、操作過程、檢驗結(jié)果的審核、結(jié)果的登記與保存、報告單的發(fā)放等一系列的制度,明確責(zé)任,錯誤的結(jié)果還是能夠避免發(fā)生的。
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