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新技術(shù)介紹之轉(zhuǎn)染技術(shù)
點擊次數(shù)：1003 發(fā)布時間：2014-9-25
導(dǎo)讀：在技術(shù)革新中，研究成功不是基于試驗次數(shù)和資料收集得多少，往往是研究方法和研究技術(shù)的革新帶來的，細胞學(xué)家一般研究是把外源分子送入細胞內(nèi)，現(xiàn)如今有一種叫做轉(zhuǎn)染技術(shù)的新技術(shù)出現(xiàn)，本文就是對轉(zhuǎn)染技術(shù)進行介紹。
過去的研究認為在不考慮具體條件，LPEI/DNA 轉(zhuǎn)染復(fù)合物的細胞毒性較低，有利于細胞定位，因此與BPEI相比應(yīng)該轉(zhuǎn)染效率高一些。但zui近研究表明BPEI的分枝度高有利于形成小的轉(zhuǎn)染復(fù)合物，從而提高轉(zhuǎn)染效率，但同時細胞毒性也增大。超高分枝的、較柔性的PEI衍生物含有額外的仲胺基和叔胺基，在染實驗中發(fā)現(xiàn)這種PEI的毒性低，但轉(zhuǎn)染效率卻較高。
GNOME轉(zhuǎn)染方案主要是通過短脈沖激光，在細胞膜上刺出微小的孔洞，使細胞外的分子能夠擴散進入細胞質(zhì)。研究者們嘗試這一策略給細胞遞送分子已經(jīng)有十多年了，但傳統(tǒng)方案的速度非常慢通量也很低。
首先將細胞與直徑約200+nm的金納米顆粒共同孵育，讓它們慢慢沉積到細胞上。三個小時之后，研究者們用短脈沖的綠色激光束照射樣本。這一過程在研究者自制的自動化設(shè)備中進行，該設(shè)備帶有能夠移動培養(yǎng)皿的自動載物臺和軟件，以便快速照射樣本。
吸收了這些光之后，金顆粒中的電子會快速震蕩并發(fā)熱。研究者們還不*清楚之后發(fā)生了什么事件，不過結(jié)果是細胞膜上出現(xiàn)了孔洞。Heinemann的研究團隊使用這一技術(shù)將siRNA引入了犬類的癌細胞系，對一個基因進行了有效的knocked+down。據(jù)估計，差不多有90%25的細胞被成功轉(zhuǎn)染，處理之后的細胞超過80%25仍有活性。
優(yōu)勢：GNOME轉(zhuǎn)染非常溫和，有很高的細胞活性，敏感細胞一般也能達到90%。
相信不久的將來這種技術(shù)會更加活躍，相繼出現(xiàn)轉(zhuǎn)染技術(shù)的各種產(chǎn)品和各種新型研究方法。