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上海遠(yuǎn)研生物科技有限公司

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可溶性腫瘤壞死因子受體(sTNF-R 60kDa)ELISA試劑盒

參  考  價:面議
具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號48T/96T

品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所在地上海市

更新時間:2017-04-15 20:27:16瀏覽次數(shù):218次

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可溶性腫瘤壞死因子受體(sTNF-R 60kDa)ELISA試劑盒

 

操作步驟

  1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔 10 孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品 100µl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50µl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取 100µl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取 50µl棄掉,再各取 50µl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取 50µl 分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,混勻后從第七、第八孔中分別取 50µl 加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 50µl,混勻后從第九第十孔中各取 50µl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為 50µl,濃度分別為 150 pg/mL,100 pg/mL ,50 pg/mL,25pg/mL,12.5 pg/mL)。
  2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5 倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育 30 分鐘。
  4. 配液:將 30(48T的 20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的 20倍)倍稀釋后備用。 
  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復(fù) 5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50µl,空白孔除外。
  7. 溫育:操作同 3。
  8. 洗滌:操作同 5。
  9. 顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘. 
  10. 終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  11. 測定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD 值)。 測定應(yīng)在加終止

 

注:本試劑只用于科研,不能臨床。

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