人腫瘤壞死因子α（TNF-α）說明書

試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人腫瘤壞死因子α（TNF-α）水平。用純化的人腫瘤壞死因子α（TNF-α）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α，再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人腫瘤壞死因子α呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人腫瘤壞死因子α（TNF-α）濃度。

人腫瘤壞死因子α（TNF-α）說明書

試劑盒組成
說明書
封板膜
密封袋
酶標(biāo)包被板
標(biāo)準(zhǔn)品：450ng/L
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
酶標(biāo)試劑
樣品稀釋液
顯色劑A液
顯色劑B液
終止液
濃縮洗滌液

人腫瘤壞死因子α（TNF-α）說明書

操作步驟

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為300 ng/L，200ng/L ，100ng/L，50 ng/L，25 ng/L）。
2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。
5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人腫瘤壞死因子α（TNF-α）說明書

1306-06-5,羥基磷灰石,羥磷灰石,骨粉,HAP
6×DNA上樣緩沖液1ML價(jià)格
96T/48T，Human alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3,AFP-L3 ELISA Kit，人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒
TGFβ2,人轉(zhuǎn)化生長因子β2Elisa試劑盒
HA,雞透明質(zhì)酸Elisa試劑盒
7524-52-9,L-*甲酯鹽,H-Trp-OMe•HCl
96T/48T，Mouse plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1 ELISA Kit ，小鼠纖溶酶原激活物抑制因子1(PAI-1)ELISA試劑盒
微量可調(diào)移液器P20
Tris-Cl溶液 (1M, pH 8.0)價(jià)格Tris-Cl (1M, pH 8.0)
481-74-3,大黃根酸,大黃酚,驅(qū)蟲豆酸,3-甲基-1,8-二羥基蒽醌,1,8-二羥基-3-甲基蒽醌,Chrysophanic acid
96T/48T，Rat Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AMAC-1 ELISA Kit，大鼠巨噬細(xì)胞替代激活相關(guān)化學(xué)因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒 
9012-36-6,瓊脂糖SFR,高分辨率低熔點(diǎn)瓊脂糖
13870-29-6,焦硫酸鈉,Sodium pyrosulfate
148-24-3,8-羥基喹啉,8-氫氧化喹啉,8-羥基氮(雜)萘,鄰羥基氮(雜)萘,8-羥基氮萘,喔星,8-羥基氮雜萘,8-Hydroxyquinoline
DNA純化瓊脂糖凝膠FF,PlasmidSelect DNA
96T/48T，Human complement control protein,CCP ELISA Kit，人補(bǔ)體調(diào)節(jié)蛋白(CCP)ELISA試劑盒 
EG-VEGF,人內(nèi)分泌腺來源的血管內(nèi)皮生長因子Elisa試劑盒
蛋白膠微量回收試劑盒