小鼠碳酸酐酶2(CA-2)ELISA Kit
Elisa試劑盒檢測(cè)原理:
采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
樣品類型(SAMPLE TYPES):
標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清 或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測(cè)種類。取材前須向銷售人員索要說(shuō)明書(shū)。
樣品采集:
收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在 4 ℃ 備用,如有特殊 原因需要周期收集標(biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時(shí), -20 ℃ 可保存 1 個(gè)月。 -70 度可保存 6 個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加*。
操作步驟:
參照說(shuō)明書(shū)
產(chǎn)品用途:
本公司提供實(shí)驗(yàn)代測(cè)服務(wù).您只需將需要檢測(cè)的種屬(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)和檢測(cè)指標(biāo)(介素類、因子類)及標(biāo)本數(shù)量(48T/96T)通知公司業(yè)務(wù)員即可。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起,現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測(cè)報(bào)告交到客戶手中!請(qǐng)寄標(biāo)本時(shí)需注明以下情況: 1、標(biāo)本編號(hào);2、所測(cè)項(xiàng)目;3、是否做復(fù)孔;3、;4、實(shí)驗(yàn)后標(biāo)本是否寄回。
產(chǎn)品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動(dòng)物細(xì)胞因子;細(xì)胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研Elisa檢測(cè)試劑盒
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異,以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
測(cè)定步驟:
測(cè)定時(shí)一般需經(jīng)過(guò)以下步驟:固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個(gè)方面。
1.隨著病情的進(jìn)展或由其他因素影響,某些抗體在機(jī)體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動(dòng),因此有必要對(duì)標(biāo)本進(jìn)行預(yù)處理,例如對(duì)血清標(biāo)本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測(cè)定中,標(biāo)本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標(biāo)本時(shí)必須每份標(biāo)本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時(shí)則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測(cè)中,還應(yīng)注意操作時(shí)差的影響。加樣及混勻時(shí)間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時(shí)間不*,對(duì)競(jìng)爭(zhēng)法及定量檢測(cè)影響很大,不注意可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤結(jié)果或定量不準(zhǔn)。
4.洗滌是ELISA操作過(guò)程中決定實(shí)驗(yàn)成敗的一個(gè)關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標(biāo)本中與反應(yīng)無(wú)關(guān)的成分、游離的酶標(biāo)物以及反應(yīng)過(guò)程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)??捎孟窗鍣C(jī)洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準(zhǔn)確判定結(jié)果須使用ELISA測(cè)讀儀(酶標(biāo)儀),比色法判讀可選擇單波長(zhǎng)或雙波長(zhǎng),根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長(zhǎng)的濾光片,以空白孔校零測(cè)定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標(biāo)儀具有良好的重復(fù)性。
敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等特點(diǎn)。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。ELISA常用方法:雙抗體夾心法測(cè)定。
貯藏:2-8℃
包裝:盒裝,96T/盒、48T/盒
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