人環(huán)加氧酶2(COX-2)ELISA Kit
Elisa試劑盒檢測原理:
采用雙抗體夾心ABC-ELISA法
保存:2-8℃
樣品類型(SAMPLE TYPES):
標本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清 或血漿。每個標本量收集體積=100ul×檢測種類。取材前須向銷售人員索要說明書。
樣品采集:
收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當(dāng)天進行檢測的標本,儲存在 4 ℃ 備用,如有特殊 原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在 -20 ℃ 或 -70 ℃ 條件下保存。避免反復(fù)凍融。標本 2 -8 ℃ 可保存 48 小時, -20 ℃ 可保存 1 個月。 -70 度可保存 6 個月。部分激素類標本需添加*。
操作步驟:
參照說明書
產(chǎn)品用途:
本公司提供實驗代測服務(wù).您只需將需要檢測的種屬(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)和檢測指標(介素類、因子類)及標本數(shù)量(48T/96T)通知公司業(yè)務(wù)員即可。在接到客戶標本當(dāng)日起,現(xiàn)貨產(chǎn)品一周內(nèi)將檢測報告交到客戶手中!請寄標本時需注明以下情況: 1、標本編號;2、所測項目;3、是否做復(fù)孔;3、;4、實驗后標本是否寄回。
產(chǎn)品范圍:
人,小鼠,大鼠,豬,兔,其它動物細胞因子;細胞凋亡,活性多肽、自身抗體 ,血栓與止血, 骨代謝,肝纖維化,腫瘤,激素內(nèi)分泌、自身抗體科研Elisa檢測試劑盒
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,*使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
測定步驟:
測定時一般需經(jīng)過以下步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。ELISA操作較繁雜,操作不當(dāng)將引起較大的誤差。在操作中應(yīng)注意以下5個方面。
1.隨著病情的進展或由其他因素影響,某些抗體在機體內(nèi)的含量發(fā)生大幅波動,因此有必要對標本進行預(yù)處理,例如對血清標本作適當(dāng)稀釋,或離心分離血脂等。間接法測定中,標本適當(dāng)稀釋還可降低非特異性反應(yīng)。
2.加樣一般使用加液器,在ELISA中一般有4次加樣:加標本、加酶結(jié)合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉污染。加酶結(jié)合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3.在成批手工檢測中,還應(yīng)注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體反應(yīng)和酶促反應(yīng)時間不*,對競爭法及定量檢測影響很大,不注意可能會導(dǎo)致錯誤結(jié)果或定量不準。
4.洗滌是ELISA操作過程中決定實驗成敗的一個關(guān)鍵步驟。目的是除去未結(jié)合的免疫反應(yīng)物,終止抗原抗體反應(yīng),除去標本中與反應(yīng)無關(guān)的成分、游離的酶標物以及反應(yīng)過程中吸附于固相載體上的非特異性物質(zhì)??捎孟窗鍣C洗板或手工洗板,前者洗滌質(zhì)量較好,各反應(yīng)孔洗滌效果均一,批內(nèi)、批間差異小,手工洗板應(yīng)注意控制各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5.準確判定結(jié)果須使用ELISA測讀儀(酶標儀),比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據(jù)反應(yīng)液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應(yīng)孔的吸光度值(A值)。酶標儀具有良好的重復(fù)性。
敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷試劑盒。且擁有試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等特點。ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性,又保留酶的活性。ELISA常用方法:雙抗體夾心法測定。
貯藏:2-8℃
包裝:盒裝,96T/盒、48T/盒
如有問題可與我司業(yè)務(wù)員!上海友騰生物科技有限公司提供各種種屬、各種系列ELISA檢測試劑盒,*于實驗室科學(xué)研究用,不適用于臨床診斷。公司提供免費代測服務(wù),詳情請或咨詢在線人員。 傳真 手機