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技術(shù)文章

脂肪干細(xì)胞的培養(yǎng)方法

閱讀：1551發(fā)布時間：2017-6-1

脂肪干細(xì)胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）是近年來從脂肪組織中分離得到的一種具有多向分化潛能的干細(xì)胞。研究發(fā)現(xiàn)ADSCs細(xì)胞能夠在體外穩(wěn)定增殖且衰亡率低，同時它具有取材容易、少量組織即可獲取大量干細(xì)胞，適宜大規(guī)模培養(yǎng)，對機體損傷小等優(yōu)點，而且其來源廣泛，體內(nèi)儲備量大，適宜自體移植，逐漸成為近年來新的研究熱點之一。

培養(yǎng)方法：

    將脂肪組織沖凈，稱重后消化。當(dāng)消化完成后，棄掉上層未消化的脂肪組織，將下層的細(xì)胞懸液以1500 r/min（375g），離心10 min 后棄上清，得到離心管底部的脂肪干細(xì)胞團，將其重懸，密度調(diào)整到1×105mL-1，然后接種在培養(yǎng)面積為25 cm2 的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。

    當(dāng)干細(xì)胞長滿培養(yǎng)瓶后按一傳二進行傳代，具體的傳代方法是：首先，用D-Hanks 沖洗一遍細(xì)胞，然后加入2 mL 的混合酶溶液（0.25%*和0.02%EDTA）消化，當(dāng)在顯微鏡下觀察到細(xì)胞發(fā)生明顯的變形，縮成球狀后，立即用含有10%胎牛血清的培養(yǎng)基中止消化，并用吸管輕輕吹打瓶底部，確保細(xì)胞*脫落分離到懸液中，再把細(xì)胞懸液置于離心機上，以1000 r/min （167g），離心5 min。zui后，將離心得到的細(xì)胞團重懸，調(diào)整密度為合適密度進行接種。


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