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技術(shù)文章

Elisa試劑盒測(cè)定標(biāo)本的保管和收集

閱讀：409發(fā)布時(shí)間：2015-1-22

標(biāo)本zui為常用的是血漿或血清，有的由于特定的檢測(cè)項(xiàng)目，也常用到尿液、唾液、糞便等標(biāo)本。目前血漿血清標(biāo)本測(cè)定的標(biāo)志物一般有傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物、激素、特種蛋白、細(xì)胞因子和治療藥物等。在收集處理和保存上要注意下面幾點(diǎn)：
　　首先要注意避免出現(xiàn)嚴(yán)重溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán)，其有類似過(guò)氧化物的活性，因此，在以HRP為標(biāo)記酶的ELISA測(cè)定中，如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高，則其就很容易在溫育過(guò)程中吸附于固相，從而與后面加入的HRP底物反應(yīng)顯色。
　　其次要注意樣本的采集及血清分離中要盡量避免細(xì)菌污染，這是因?yàn)榧?xì)菌的生長(zhǎng)，所分泌的一些酶可能會(huì)對(duì)抗體抗原蛋白產(chǎn)生分解作用；有些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身就會(huì)對(duì)用相應(yīng)酶作標(biāo)記的方法測(cè)定產(chǎn)生非特異性干擾。
　　第三，血清標(biāo)本應(yīng)該以無(wú)菌操作分離，可以在2～8℃下保存一周，樣本的長(zhǎng)時(shí)間保存，要在-70℃保存。如為有菌操作，則建議冰凍保存
　　第四，冰凍保存的血清標(biāo)本不要進(jìn)行劇烈振蕩，混勻即可，一定避免反復(fù)凍融。標(biāo)本的反復(fù)凍融所產(chǎn)生的機(jī)械剪切力將對(duì)標(biāo)本中的蛋白等分子產(chǎn)生破壞作用，可能引起假陰性結(jié)果。另外凍融標(biāo)本的要注意混勻。
　　zui后標(biāo)本在保存中如出現(xiàn)細(xì)菌污染所致的混濁或絮狀物時(shí)，離心沉淀后取上清檢測(cè)。


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