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小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),測定小鼠說明書,Elisa試劑盒

時間:2014-3-3閱讀:378
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小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),測定小鼠說明書,Elisa試劑盒

谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)的活性

本試劑僅供研究使用

小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),測定小鼠說明書,Elisa試劑盒

試劑盒組成          48孔配置    96孔配置    保存
說明書    1份    1份    
封板膜    2片(48)    2片(96)    
密封袋    1個    1個    
酶標(biāo)包被板    1×48    1×96    2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品:27U/L    0.5ml×1瓶    0.5ml×1瓶    2-8℃保存
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液    1.5ml×1瓶    1.5ml×1瓶    2-8℃保存
酶標(biāo)試劑    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
樣品稀釋液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑A液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
顯色劑B液    3 ml×1瓶    6 ml×1瓶    2-8℃保存
終止液    3ml×1瓶    6ml×1瓶    2-8℃保存
20倍濃縮洗滌液    20ml×1瓶    30ml×1瓶    2-8℃保存

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實(shí)驗(yàn)原理:

     本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平。用純化的小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),再與HRP標(biāo)記的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)活性濃度

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計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD 值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

 

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