帕金蛋白抗體,Anti-Parkin protein，
產(chǎn)品類型 一抗
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帕金蛋白抗體,Anti-Parkin protein，Western的經(jīng)驗：
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了（Re-Blot）,有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置）,也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋（-70度>3小時）（Bio-Rad）,這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.（不信的可以試試!!）
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉，部分相關(guān)產(chǎn)品：
Ys-3325R 磷酸化蛋白酶活化受體4抗體 Anti-Phospho-PAR4 （Thr163）
Ys-1865R 帕金蛋白抗體 Anti-Parkin protein
Ys-0769R 多腺苷二磷酸多聚酶抗體 Anti-PARP
Ys-2138R 多腺苷二磷酸多聚酶抗體（N端） Anti-PARP （N-Terminus）
Ys-1199R 配對盒基因1抗體 Anti-PAX1
Ys-1187R 配對盒基因2抗體 Anti-PAX2
Ys-1097R 配對盒基因3抗體 Anti-PAX3
Ys-1861R 配對盒基因5抗體 Anti-PAX5
Ys-2413R 配對盒基因7抗體 Anti-PAX7
Ys-1201R 配對盒基因8抗體 Anti-PAX8
Ys-1102R 配對盒基因9抗體 Anti-PAX9
Ys-3523R PDZ連接激酶/T-LAK細(xì)胞源蛋白激酶抗體 Anti-PBK/TOPK
Ys-3326R 磷酸化PDZ連接激酶/T-LAK細(xì)胞源蛋白激酶抗體 Anti-Phospho-PBK/TOPK （Thr9）
Ys-3539R 樁蛋白Paxillin抗體 Anti-Paxillin
Ys-3352R 磷酸化樁蛋白Paxillin抗體 Anti-Phospho-Paxillin （Tyr118）
Ys-1159R P-鈣粘附分子抗體 Anti-P-cadherin
Ys-3675R R-鈣粘附分子抗體 Anti-R-cadherin
Ys-1617R 肝腸鈣粘連蛋白抗體 Anti-LI-cadherin

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