白細胞免疫球蛋白樣受體-B抗體,LILRB3,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗所需全部相關(guān)試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體,歡迎新老客戶訂購。
白細胞免疫球蛋白樣受體-B抗體,LILRB3,Western的經(jīng)驗:
1.關(guān)于反復(fù)標記和再標記:一張膜上可以同時標記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標記了(Re-Blot),有些公司有再標記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-2035R 無腦回的致病基因LIS1抗體 LIS1
Ys-2691R 白細胞免疫球蛋白樣受體-B抗體 LILRB3/CD85a/PirB
Ys-2657R LIX1抗體 LIX1
Ys-0738R 凋亡抑制蛋白抗體 Livin
Ys-1532R 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 phospho-LKB1(Thr363)
Ys-3248R 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 phospho-LKB1(Ser334)
Ys-3249R 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 phospho-LKB1(Ser428)
Ys-3250R 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 Phospho-LKB1(Thr189)
Ys-0824R 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 LFABP/FABP-1
Ys-0897R 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 LFABP/FABP-2
Ys-0821R 層粘連蛋白抗體 laminin
Ys-1526R 層粘連蛋白β1抗體 Laminin Beta 1
Ys-1839R 核纖層蛋白A抗體 lamin A
Ys-3254R 磷酸化核纖層蛋白A/C抗體 Phospho-Lamin A/C (Ser22)
Ys-1840R 核纖層蛋白B抗體 Lamin B
Ys-1841R 核纖層蛋白C抗體 lamin C
Ys-2044R 凝集素樣氧化型低密度脂蛋白受體抗體 LOX-1/OLR1
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