白血病抑制因子抗體,LIF,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,歡迎新老客戶訂購(gòu)。
白血病抑制因子抗體,LIF,Western的經(jīng)驗(yàn):
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時(shí)標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個(gè)目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個(gè)抗體是不同的二抗.在兩個(gè)目的片段相差小于5KD時(shí),就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡(jiǎn)單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個(gè)抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅(jiān)固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個(gè)10個(gè)不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度:轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時(shí))(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時(shí)花很多時(shí)間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時(shí)候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實(shí)轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動(dòng),現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個(gè)平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時(shí)間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時(shí)間為1小時(shí),大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們?cè)囘^幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國(guó)產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-1058R 白血病抑制因子抗體 LIF
Ys-1458R 白血病抑制因子受體抗體 LIFR/CD118
Ys-1177R Nogo受體反應(yīng)蛋白抗體 Lingo-1
Ys-2775R 單*蛋白激酶1抗體 LIMK1
Ys-3247R 磷酸化單*蛋白激酶1/2抗體 Phospho-LIMK1 (Thr508)/LIMK2 (Thr505)
Ys-2656R 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體6抗體 LIR-6
Ys-2658R 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體8抗體 LIR-8/CD85c/LILRB5
Ys-2035R 無(wú)腦回的致病基因LIS1抗體 LIS1
Ys-2691R 白細(xì)胞免疫球蛋白樣受體-B抗體 LILRB3/CD85a/PirB
Ys-2657R LIX1抗體 LIX1
Ys-0738R 凋亡抑制蛋白抗體 Livin
Ys-1532R 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 phospho-LKB1(Thr363)
Ys-3248R 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 phospho-LKB1(Ser334)
Ys-3249R 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 phospho-LKB1(Ser428)
Ys-3250R 磷酸化*/*蛋白激酶抗體 Phospho-LKB1(Thr189)
Ys-0824R 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 LFABP/FABP-1
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