胰島素受體底物-3抗體,IRS-3,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,歡迎新老客戶訂購。
胰島素受體底物-3抗體,IRS-3,Western的經(jīng)驗(yàn):
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實(shí)轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-0186R 胰島素受體底物-3抗體 IRS-3
Ys-0187R 胰島素受體底物-4抗體 IRS-4
Ys-0641R 整合素α4抗體 Integrin alpha 4/CD49d
Ys-1816R 整合素α7抗體 Integrin alpha 7
Ys-0486R 整合素β1抗體 Integrin beta 1/CD29
Ys-0567R 整合素α5抗體 Integrin alpha 5/CD49e
Ys-2250R 整合素αV抗體 Integrin alpha V/CD51
Ys-2641R 整合素α6抗體 Integrin alpha 6/CD49f
Ys-0342R 整合素β3抗體 Integrin Beta 3/CD61
Ys-1439R 蛋白質(zhì)*激酶JAK-1抗體 JAK1
Ys-3238R 磷酸化蛋白質(zhì)*激酶JAK-1抗體 Phospho-Jak1 (Tyr1022/1023)
Ys-0908R 蛋白質(zhì)*激酶JAK-2抗體 JAK2
Ys-2485R 磷酸化蛋白*激酶JAK-2抗體 phospho-JAK2(Tyr1007+Tyr1008)
Ys-3206R 磷酸化蛋白*激酶JAK-2抗體 phospho-JAK2(Tyr221)
Ys-2808R 蛋白*激酶JAK-3抗體 Jak3
Ys-3207R 磷酸化蛋白*激酶JAK-3抗體 Phospho-Jak3 (Tyr785)
Ys-3208R 磷酸化蛋白*激酶JAK-3抗體 Phospho-Jak3 (Tyr980/981)
Ys-0501R 氨基末端激酶1/3抗體 JNK1/3
Ys-2900R 氨基末端激酶2抗體 JNK2
Ys-2997R 氨基末端激酶3抗體 JNK3/MAPK10
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