G蛋白偶聯(lián)受體54抗體,KiSS1R/GPR54，
產(chǎn)品類型 一抗
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G蛋白偶聯(lián)受體54抗體,KiSS1R/GPR54，Western的經(jīng)驗：
1.關于反復標記和再標記:一張膜上可以同時標記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標記了（Re-Blot）,有些公司有再標記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關于轉膜時的溫度:轉膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉膜裝置）,也可以在轉膜液中放入合適的事先準備的冰袋（-70度>3小時）（Bio-Rad）,這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關鍵的關鍵,其實轉膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔心短路的.（不信的可以試試!!）
4.關于轉膜電流和時間:一般轉膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
，部分相關產(chǎn)品：
Ys-1469R G蛋白偶聯(lián)受體75抗體 GRP75
Ys-2575R 血型糖蛋白A（涎糖蛋白）抗體 GPA/GYPA/CD235a
Ys-1807R G蛋白偶聯(lián)受體78抗體 GPR78
Ys-2501R G蛋白偶聯(lián)受體54抗體 KiSS1R/GPR54
Ys-2582R G蛋白偶聯(lián)受體109A抗體 GPR109A/HM74A
Ys-1082R G蛋白偶合受體激酶1抗體 GRK1
Ys-1209R G蛋白偶合受體激酶2抗體 GRK2/BARK1
Ys-3594R 干擾素/維甲酸誘導凋亡相關基因抗體 GRIM19
Ys-1803R 促代謝型*受體1抗體 GRM1
Ys-1161R 促代謝型*受體2抗體 GRM2/GLUR2
Ys-3169R 磷酸化促代謝型*受體2抗體 Phospho-GRM2/GLUR2 （Tyr869/873/876）
Ys-3170R 磷酸化促代謝型*受體2抗體 Phospho-GRM2/GLUR2 （Tyr876）
Ys-1237R 促代謝型*受體M3抗體 GRM3
Ys-1894R 促代謝型*受體4抗體 GRM4/mGluR4
Ys-1247R 促代謝型*受體5抗體 GRM5/mGluR5
Ys-2139R 促代謝型*受體2+4抗體 GRM2+GRM4
Ys-0863R 生長調節(jié)致癌基因-1抗體 GRO Alpha/GRO-1

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