纖維連接蛋白抗體,FN/Fibronectin 1,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應(yīng)免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗(yàn)所需全部相關(guān)試劑、熒光標(biāo)記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標(biāo)記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實(shí)驗(yàn)抗體,歡迎新老客戶訂購(gòu)。
纖維連接蛋白抗體,FN/Fibronectin 1,Western的經(jīng)驗(yàn):
1.關(guān)于反復(fù)標(biāo)記和再標(biāo)記:一張膜上可以同時(shí)標(biāo)記很多抗體,但要注意,一般在兩個(gè)目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個(gè)抗體是不同的二抗.在兩個(gè)目的片段相差小于5KD時(shí),就需要經(jīng)過(guò)處理,再標(biāo)記了(Re-Blot),有些公司有再標(biāo)記的現(xiàn)成試劑,不過(guò)比較貴,zui簡(jiǎn)單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標(biāo)記了.要做多個(gè)抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅(jiān)固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個(gè)10個(gè)不同的抗體.
2.關(guān)于轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度:轉(zhuǎn)膜時(shí)的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰浴(Pharmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準(zhǔn)備的冰袋(-70度>3小時(shí))(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關(guān)于三名治:本人以前做時(shí)花很多時(shí)間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時(shí)候根本沒(méi)有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關(guān)鍵的關(guān)鍵,其實(shí)轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動(dòng),現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個(gè)平面,所以不用擔(dān)心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關(guān)于轉(zhuǎn)膜電流和時(shí)間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時(shí)間為1小時(shí),大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過(guò)本人覺(jué)得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過(guò)去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過(guò)我們?cè)囘^(guò)幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國(guó)產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
,部分相關(guān)產(chǎn)品:
Ys-3657R 半*蛋白酶8相關(guān)蛋白2抗體 FLASH/CASP8AP2
Ys-1462R 絲聚蛋白/中間絲蛋白抗體 FLG(filaggrin)
Ys-0119R 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體 FLIP S/L
Ys-1120R 凋亡調(diào)節(jié)基因之一抗體(短型) FLIPS
Ys-2767R FMS樣*激酶3 FLT-3/CD135
Ys-3147R 磷酸化FMS樣*激酶3 Phospho-FLT3 (Tyr591)
Ys-3149R 磷酸化FMS樣*激酶3 Phospho-FLT3 (Tyr589/591)
Ys-3150R 磷酸化FMS樣*激酶3 Phospho-FLT3 (Tyr842)
Ys-3151R 磷酸化FMS樣*激酶3 Phospho-FLT3 (Tyr969)
Ys-0666R 纖維連接蛋白抗體 FN/Fibronectin 1
Ys-1170R FosB蛋白抗體 FOS B
Ys-2572R 甲酸基肽受體1抗體 FPR1
Ys-1154R FRA-1蛋白抗體 FRA1/FOSL1
Ys-3158R 磷酸化FRA-1蛋白抗體 Phospho-FRA1 (Ser265)
Ys-1188R FRA2/FOSL2抗體 FRA2/FOSL2
Ys-1675R 雞白痢、雞傷寒抗體 fowl typhoid and pullorum disease
Ys-2585R 叉頭蛋白F1抗體 FOXF1
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