Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關蛋白,F(xiàn)ADD,
產(chǎn)品類型 一抗
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我公司*供應免疫組化抗體、WB抗體、免疫組化試劑盒和抗體試驗所需全部相關試劑、熒光標記抗體、elisa抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、各種標記的二抗IgG/IgM/IgD/IgA等科研實驗抗體,歡迎新老客戶訂購。
Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關蛋白,F(xiàn)ADD,Western的經(jīng)驗:
1.關于反復標記和再標記:一張膜上可以同時標記很多抗體,但要注意,一般在兩個目的蛋白相差在5KD以上的,先后兩個抗體是不同的二抗.在兩個目的片段相差小于5KD時,就需要經(jīng)過處理,再標記了(Re-Blot),有些公司有再標記的現(xiàn)成試劑,不過比較貴,zui簡單的方法是:ddH2O洗5分鐘,0.2MNaOH5分鐘,再用ddH2O5分鐘*3次,然后可以再標記了.要做多個抗體的膜\的選擇,用PVDF或教堅固的,*用Amsham的Hybond-P,Hybond-Extra.本人zui多在一張膜上做個10個不同的抗體.
2.關于轉(zhuǎn)膜時的溫度:轉(zhuǎn)膜時的溫度比較重要,保持在10度以下,可以用冰?。≒harmacia的轉(zhuǎn)膜裝置),也可以在轉(zhuǎn)膜液中放入合適的事先準備的冰袋(-70度>3小時)(Bio-Rad),這樣既可以降溫又可以節(jié)約Buffer.
3.關于三名治:本人以前做時花很多時間在防止短路上,現(xiàn)在我做的時候根本沒有剪齊,zui主要的是趕氣泡,這是關鍵的關鍵,其實轉(zhuǎn)膜的原理是電流的單向流動,現(xiàn)在的好多公司的轉(zhuǎn)膜裝置的電極是一個平面,所以不用擔心短路的.(不信的可以試試!!)
4.關于轉(zhuǎn)膜電流和時間:一般轉(zhuǎn)膜的電流在200mA-400mA之間時間為1小時,大片段的>50KD的可以選用350mA,小片段的可以用250mA,不過本人覺得上述電流均能很好的把大部分蛋白轉(zhuǎn)過去.
5.用脫脂奶粉封閉的效果不一定比用BSA差,不過我們試過幾種奶粉,有一些奶粉不太適合.*使用的奶粉:雀巢高鈣奶粉,多力精低脂奶粉.一般國產(chǎn)的奶粉的顆粒比較大,不太容易溶解.
,部分相關產(chǎn)品:
Ys-0511R Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關蛋白 FADD
Ys-1349R 磷酸化Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關蛋白抗體 phospho-FADD(Ser194)
Ys-1340R 粘著斑激酶抗體 FAK
Ys-3159R 磷酸化粘著斑激酶抗體 Phospho-FAK (Tyr397)
Ys-3160R 磷酸化粘著斑激酶抗體 Phospho-FAK (Tyr861)
Ys-3162R 磷酸化粘著斑激酶抗體 Phospho-FAK (Tyr576/577)
Ys-3163R 磷酸化粘著斑激酶抗體 Phospho-FAK (Tyr925)
Ys-3164R 磷酸化粘著斑激酶抗體 Phospho-FAK (Tyr407)
Ys-1639R 磷酸化粘著斑激酶抗體 phospho-FAK (Tyr577)
Ys-1348R Fas相關1因子抗體 FAF1
Ys-1642R 磷酸化粘著斑激酶抗體 phospho-FAK (Ser732)
Ys-3357R 富含*的*激酶2抗體 FAK2/Pyk2
Ys-3400R 磷酸化富含*的*激酶2抗體 phospho-Pyk2 (Tyr402)
Ys-3401R 磷酸化富含*的*激酶2抗體 phospho-Pyk2 (Tyr881)
Ys-2738R FANCD2抗體 FANCD2
Ys-3015R 磷酸化FANCD2抗體 phospho-FANCD2(Ser222)
Ys-1580R 范可尼貧血相關蛋白F抗體 FANCF
Ys-0711R 胰腺衍生因子抗體 FAM3B/PANDER
Ys-0215R 載脂蛋白A1抗體 FAS/Apo-1/CD95
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