人正常皮膚細(xì)胞,HaCaT細(xì)胞
細(xì)胞傳代的一般方法
開(kāi)始人正常皮膚細(xì)胞,HaCaT細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、*溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%*、PBS洗液。
用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20 ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)
C02孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、—20℃冰箱
操作步驟:鏡檢,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,*溶液0.3m1,7.5%*溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%*溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液*覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞*脫落到*中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。
其它供應(yīng)新產(chǎn)品:
人τ-微管蛋白激酶2(tTBK2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人脫氧核糖核酸酶Ⅹ(DNASEⅩ)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人N-型電壓依賴鈣離子通道α1B亞基(CACNα1B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人磷酸二酯酶1A(PDE1A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠磷酸二酯酶1C(PDE1C)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人肽基*脫亞氨酶Ⅱ(PADI2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人嘌呤能受體P2Y1(P2RY1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人蛋白脂質(zhì)蛋白2(PLP2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人含桿狀病毒IAP重復(fù)蛋白7(BIRC7)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1(FATP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠精脒/精胺N1-乙酰基轉(zhuǎn)移酶1(SAT1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠C-Myc結(jié)合蛋白(MYCBP)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠*酶(GLS)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人柯薩奇病毒腺病毒受體(CXADR)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠細(xì)胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
人胎盤堿性磷酸酶樣蛋白2(ALPPL2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠琥珀酸脫氫酶復(fù)合體B亞基(SDHB)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠琥珀酸脫氫酶復(fù)合體A亞基(SDHA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠琥珀酸脫氫酶復(fù)合體C亞基(SDHC)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠琥珀酸脫氫酶復(fù)合體D亞基(SDHD)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠*(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法,高敏)
人胞苷脫氨酶(CDA)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠緊密連接蛋白1(TJP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠組織內(nèi)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β結(jié)合蛋白1(LTBP1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠腺苷酸環(huán)化酶10(ADCY10)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
大鼠蛋白酶激活受體1(PAR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)
小鼠VI型膠原(COL6)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)