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上海博麥德生物技術有限公司

人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒進口,國產(chǎn)

時間:2013-11-14閱讀:221
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實驗方法原理:人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒  

 T 細胞在體外培養(yǎng)時,受到非特異性有絲分裂原(如PHA、ConA)刺激后,可出現(xiàn)細胞體積增大,代謝旺盛,蛋白和核酸合成增加,即向淋巴母細胞轉(zhuǎn)化。淋巴細胞轉(zhuǎn)化率的高低可以反映機體的細胞免疫水平,因此可作為測定機體免疫功能的指標之一。淋巴細胞轉(zhuǎn)化試驗有形態(tài)計數(shù)法、MTT 法和同位素法三種。MTT 法即四甲基偶氮唑鹽微量酶反應比色法。MTT 是一種噻唑鹽,化學名3-(4,5-二甲基-2-噻唑)-2,5-

試劑、試劑盒:人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒

1. RPMI1640 培養(yǎng)液2. Hank’s 液3. 刀豆蛋白A(Concanvalin A, ConA),用RPMI1640 液配成1mg/ml,分裝小瓶,冷凍保存4. MTT 1mg/ml5.

實驗步驟:人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒

1. 小鼠脾細胞懸液的制備:取一個滅菌的平皿,加入5ml Hank’s液。頸椎脫臼法處死小鼠,取脾臟,放入平皿中,在鋼網(wǎng)上研磨并過篩,制成細胞懸液。取出100μl用于計數(shù)。將其余細胞懸液移入一離心管中,離心1500rpm,7min,(或1000rpm,10min)棄去上清,用RPMI1640 培養(yǎng)液稀釋,制成2.5×106 / ml的脾細胞懸液,然后加入ConA使每孔zui終濃度為2μg/ml,同時做不加ConA的陰性對照孔。2. 將上述細胞懸液加入96 孔平底培養(yǎng)板中,每孔0.1ml。3. 將培養(yǎng)板放入含有5%CO2的37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48-72 小時,在培養(yǎng)結(jié)束前4-6 小時,于培養(yǎng)板各孔內(nèi)加入1mg/mlMTT液,10μl/孔。37℃培養(yǎng)6 小時。4. 各孔內(nèi)加入0.01M 鹽酸—異丙醇110μl,30 分鐘內(nèi)(或加2%SDS 100ul/孔,過夜)用酶標測定儀測OD 值,測定波長570nm。5. 實驗結(jié)果將實驗組和對照組三個復孔的OD 值平均。轉(zhuǎn)化值=實驗組的平均OD 值-對照組的平均OD 值。 注意事項 1. 由于本實驗需要培養(yǎng)3 天,才能觀察結(jié)果。因此,在操作時應注意無菌操作,避免細菌污染,導致實驗的失敗。2. 細胞操作要輕柔、迅速,以免細胞損傷影響實驗結(jié)果。

公司主營產(chǎn)品:ELISA 試劑盒,ELISA免費代測,中國標準品,生化試劑,科研抗體,美國ATCC細胞株,生物培養(yǎng)基等產(chǎn)品經(jīng)營:人抗存活素抗體/生存蛋白(Surv)ELISA試劑盒

人白介素1可溶性受體Ⅰ(IL-1sRⅠ)ELISA試劑盒 Human soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sRⅠ ELISA試劑盒 
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人α-內(nèi)*肽(α-EP)ELISA試劑盒 Human α-Endomorphin,α-EP ELISA試劑盒
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人促睡眠肽(DSIP)ELISA試劑盒 Human delta sleep-inducing peptide,DSIP ELISA試劑盒
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