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大豆凝集素(SBA)酶聯(lián)免疫試劑盒說明

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大豆凝集素(SBA)酶聯(lián)免疫試劑盒說明

試劑盒使用說明書

本試劑盒僅供研究使用。

檢測范圍: 96T

50ng/L -850 ng/L

使用目的:

本試劑盒用于測定植物組織,細胞及其它相關(guān)樣本中大豆凝集素(SBA)含量。

實驗原理

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大豆凝集素(SBA)水平。用純化的大豆凝集素

(SBA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入大豆凝集素(SBA),再與HRP 標記的大豆凝集素(SBA)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB 顯色。TMB HRP 酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大豆凝集素(SBA)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),通過標準曲線計算樣品中大豆凝集素(SBA)濃度。

試劑盒組成

1 30 倍濃縮洗滌液 20ml×瓶 終止液 6ml×

酶標試劑 6ml×瓶 標準品(1600ng/L) 0.5ml×

酶標包被板 12 孔×條 標準品稀釋液 1.5ml×

樣品稀釋液 6ml×瓶 10 說明書 

顯色劑液 6ml×瓶 11 封板膜 

顯色劑液 6ml×1/瓶 12 密封袋 

標本要求

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能

馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

800ng/L 5 號標準品 150μl 的原倍標準品加入150μl 標準品稀釋液

400ng/L 4 號標準品 150μl 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

200ng/L 3 號標準品 150μl 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

100ng/L 2 號標準品 150μl 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

50ng/L 1 號標準品 150μl 號標準品加入150μl 標準品稀釋液

2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育3分鐘。

4. 配液:將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30 秒后棄去,如此重復,拍干。

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