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qiagen74134 RNeasy Plus Mini Kit (50)報價

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For 50 minipreps: RNeasy Mini Spin Columns, gDNA Eliminator Spin Columns, Collection Tubes, RNase-Free Water and Buffers
qiagen74134 RNeasy Plus Mini Kit (50)報價原理
細(xì)胞和易裂解組織首先在含有異硫氰酸胍的高變性Buffer RLT Plus中裂解和勻質(zhì)化,該緩沖液能使RNases立即失活,以保證分離到完整的RNA。裂解液再流過gDNA Eliminator柱。該離心柱與高鹽緩沖液共同作用,可選擇性高效的去除基因組DNA。加入乙醇以提供RNA結(jié)合的合適條件,樣本再加入到RNeasy Mini離心柱。含有硅膠膜的特制離心柱能特異性的結(jié)合裂解細(xì)胞中的RNA。
qiagen74134 RNeasy Plus Mini Kit (50)報價操作流程
可從多達(dá)107個細(xì)胞或30 mg組織中純化總RNA。簡潔的工作流程可在25分鐘內(nèi)純化得到已去除基因組DNA的RNA(參見RNeasy Plus procedure )。樣本首先被裂解和勻質(zhì)化。裂解液流過gDNA Eliminator柱,在流過gDNA Eliminator柱的溶液中加入乙醇,樣本再加上樣到RNeasy Mini離心柱。RNA結(jié)合到膜上,污染物被洗去。獲得高品質(zhì)RNA,洗脫體積30 µl或更大。
處理不同的起始樣本可用不同的實驗方案。實驗方案的不同之處主要在于樣本的裂解和勻質(zhì)化。樣本上樣到gDNA Eliminator柱之后的步驟就類似。此操作流程適合富集mRNA,不包括大部分小于200 nt的RNAs(如rRNAs和tRNAs)。RNeasy Plus操作流程稍作修改后可從培養(yǎng)細(xì)胞中純化含miRNA等小RNAs的總RNA。
使用Buffer RLT Plus(RNeasy Plus Mini Kit提供)進(jìn)行組織破碎和勻質(zhì)化時,可能會產(chǎn)生過多泡沫。在破碎和勻漿前向Buffer RLT Plus中加入Reagent DX(單獨提供)可充分減少泡沫產(chǎn)生。Reagent DX經(jīng)仔細(xì)檢測,表明配合此試劑盒使用不會影響RNA的純度或下游應(yīng)用。
qiagen74134 RNeasy Plus Mini Kit (50)報價應(yīng)用
RNeasy Plus Mini Kit純化得到的RNA適合對少量DNA敏感的下游應(yīng)用,如定量real-time RT-PCR。純化得到的RNA還可以用于其他應(yīng)用。

RNeasy Mini Kit (50) 74104 qiagen試劑

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