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小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)酶聯(lián)免疫分析免費代測

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 免費代測ELISA試劑盒一周內(nèi)出結(jié)果

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主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒,生物試劑,免疫組學(xué),生物抗體,蛋白組學(xué),分子生物等。

試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供研究使用。
檢測范圍:                                                           96T
3pg/ml-120pg/ml
使用目的:
本試劑盒用于測定小鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中轉(zhuǎn)化生長因子β 1TGF-β1)含量。實驗原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β 1TGF-β1)水平。用純化的小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β1TGF-β1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入轉(zhuǎn)化生長因子β 1TGF-β1),再與HRP標記的轉(zhuǎn)化生長因子β 1TGF-β1)抗體結(jié)合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的轉(zhuǎn)化生長因子β1TGF-β1)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度( OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β 1TGF-β1)濃度。
試劑盒組成

 

1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1
7
終止液
6ml×1
2
酶標試劑
6ml×1
8
標準品(240pg/ml
0.5ml×1
3
酶標包被板
12孔×8
9
標準品稀釋液
1.5ml×1
4
樣品稀釋液
6ml×1
10
說明書
1
5
顯色劑 A
6ml×1
11
封板膜
2
6
顯色劑 B
6ml×1/
12
密封袋
1
 
120pg/ml
5號標準品
150μl的原倍標準品加入 150μl標準品稀釋液
 
60pg/ml
4號標準品
150μl的 5號標準品加入 150μl標準品稀釋液
 
30pg/ml
3號標準品
150μl的 4號標準品加入 150μl標準品稀釋液
 
15pg/ml
2號標準品
150μl的 3號標準品加入 150μl標準品稀釋液
 
7.5pg/ml
1號標準品
150μl的 2號標準品加入 150μl標準品稀釋液
 

 

 

標本要求
1           標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于 -20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2           NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。
 
操作步驟
1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣 50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。
4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復(fù) 5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標試劑 50μl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50μl,再加入顯色劑 B50μl,輕輕震蕩混勻, 37℃避光顯色15分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。

 

11.測定:以空白空調(diào)零, 450nm波長依序測量各孔的吸光度( OD值)。測定應(yīng)在加終止液后 15

 

分鐘以內(nèi)進行。

 

操作程序總結(jié):
計算

以標準物的濃度為橫坐標, OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的了解更多詳細信息

 

對外承攬試驗:免疫組化,熒光,Tunel,Elisa,WB

原位雜交,比色法,HE染色,特染,圖像分析,!    (北京雅安達生物技術(shù)有限公司)

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