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細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑盒產(chǎn)品說明書

2015-4-23  閱讀(3148)

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【詳細(xì)說明】

主要用途


 細(xì)胞線粒體內(nèi)鈣離子濃度熒光檢測(cè)試劑是一種旨在通過線粒體鈣離子特異性熒光探針Rhod-2,與鈣離子結(jié)合后,其熒光強(qiáng)度顯著增強(qiáng),在熒光分光光度儀下觀察相對(duì)熒光峰值的變化,來測(cè)定細(xì)胞線粒體中總鈣離子濃度而經(jīng)典的技術(shù)方法。該技術(shù)經(jīng)過精心研制、成功實(shí)驗(yàn)證明的。其適用于各種活體細(xì)胞(動(dòng)物、人體等)內(nèi)線粒體鈣離子的濃度檢測(cè)。產(chǎn)品嚴(yán)格無(wú)菌,即到即用,操作簡(jiǎn)捷,性能穩(wěn)定,檢測(cè)敏感。


技術(shù)背景


鈣是人體中的一種重要電介質(zhì)和礦物質(zhì),占1150克。其中99%的鈣以氟磷灰石鈣(calcium fluorophosphate apatite)形式存在于骨組織中。非骨組織鈣成分主要存在于細(xì)胞內(nèi)。鈣具有兩種主要形式:一種是非彌散型蛋白結(jié)合鈣,其構(gòu)成約40%至50%的血清中的總鈣含量;另一種為彌散型游離鈣,其進(jìn)一步分成具有活性的復(fù)合鈣(complexed calcium)和離子鈣(ionized calcium)。鈣對(duì)神經(jīng)肌肉興奮性(neuromuscular excitability)、血液凝固、酶的激活、離子跨膜運(yùn)輸、釋放神經(jīng)傳導(dǎo)介質(zhì)、信使傳導(dǎo)等方面起著重要作用。在細(xì)胞內(nèi),鈣離子主要儲(chǔ)存在線粒體和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器中。其中線粒體鈣離子在調(diào)節(jié)線粒體代謝、保持線粒體的ATP產(chǎn)量達(dá)到細(xì)胞需求,維持細(xì)胞內(nèi)環(huán)境鈣離子平衡方面起著重要作用。線粒體鈣的檢測(cè)包括沉淀法、EDTA鰲合滴定法、火焰光度法(flame photometry)、原子吸收分光光度法等技術(shù),但容易受到鈉、鉀、磷酸鹽、硫酸鹽的干擾,或者受限于儀器的特殊的要求,以及需要線粒體純化。Rhod-2,羅丹明123(rhodamine 123)的衍生產(chǎn)物,一種與鈣離子結(jié)合產(chǎn)生熒光,同時(shí)其正電荷特性,特異性地聚集在線粒體里, 由此用于測(cè)定線粒體內(nèi)鈣離子水平。在熒光分光光度儀下,激發(fā)波長(zhǎng)550nm,散發(fā)波長(zhǎng)590nm,來定量測(cè)定線粒體的鈣濃度。



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