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上海哈靈生物科技有限公司
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公司信息
基質金屬蛋白酶（MMP）明膠酶譜法電泳分析試劑盒產品說明書
2016-6-20 閱讀(603)
主要用途
我公司基質金屬蛋白酶（MMP）明膠酶譜法（gelatin-zymography）電泳分析試劑是一種旨在通過明膠聚丙烯酰胺凝膠電泳的方法，在分離、蛋白復性、底物水解、染色等一系列步驟下，觀察并半定量深藍色背景中的無色清晰的基質金屬蛋白酶條帶，根據(jù)分子量確定特異基質金屬蛋白酶及其活性的而經典的技術方法。該技術經過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種細胞萃取樣品（動物、人體、植物、昆蟲等）、培養(yǎng)上清懸液、血清和關節(jié)滑液或腦脊液等基質金屬蛋白酶-2，9，以及13等活性及其抑制劑的檢測。產品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，敏感度高，條帶清晰，重復性好。
注意事項
- 本產品為5次（45個樣品）操作
- 操作時，須戴手套
- 樣品準備要點如下：
- 必須澄清，至關重要：4℃高速離心5分鐘，速度為10000g，置于－70℃保存待測
- 樣品中避免使用EDTA、EGTA等二價陽離子鰲和劑以及巰基乙醇和DTT等
- 樣品中避免使用硫醇抑制劑（THIOL INHIBITOR）
- 由于TIMP等天然抑制劑的存在，血清樣品中的基質金屬蛋白酶活性很低，可以使用活化劑（建議使用膠原酶潛酶活化劑（APMA）－12197）
- 如果驗證樣品中基質金屬蛋白酶，可以使用抑制劑EDTA對照
- 避免培養(yǎng)細胞上清樣品顯示黃色，表明已經過于酸性，須調整pH為中性方可使用
- 膠體和膠頂配制前，須25℃預熱相關試劑
- 電泳前注意清洗樣品孔
- 電泳運行，注意安全
- 染色時，避免光照
